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申请/专利权人：山东理工大学

摘要：本发明公开了一种同时检测黄曲霉毒素B1AFB1和玉米赤霉烯酮毒素ZEN的双靶适配体传感器及其制备方法，涉及生物传感器技术领域；引入二硫化钼‑还原性氧化石墨烯MoS2‑rGO纳米材料提高工作电极的生物相容性，比表面积和导电性能，运用6‑二茂铁基己硫醇FC6S和硫堇Thi通过纳米金AuNPs分别标记AFB1适配体DNA1和ZEN适配体DNA2，构建的双靶标适配体功能化探针通过金硫键固定到电极上，该探针可在差分脉冲伏安法DPV不同电位下产生互不干扰的可区分电流峰以实现对AFB1和ZEN的同时检测；构建的传感器具有较好的重现性、抗干扰性和稳定性，在实际样品检测中获得了满意的回收率。

主权项：1.一种同时检测AFB1和ZEN的双靶适配体传感器，其特征在于：包含AFB1适配体DNA1、ZEN适配体DNA2以及金电极，所述DNA1采用硫堇、纳米金进行标记形成DNA1-AuNPs-Thi适配体功能化探针，所述DNA2采用6-二茂铁基己硫醇、纳米金进行标记形成DNA2-AuNPs-FC6S适配体功能化探针，所述金电极的表面引入二硫化钼-还原性氧化石墨烯，标记后的双靶适配体功能化探针通过金硫键固定于电极表面，其制备过程包括如下步骤：1适配体标记处理：将DNA1、DNA2两种适配体分别与纳米金分散液混匀6～8h，离心弃上清后分散于TE缓冲液，在DNA1-AuNPs中加入Thi，在DNA2-AuNPs中加入FC6S，继续混匀6～8h，再次离心弃上清后分散于TE缓冲液得到：DNA1-AuNPs-Thi和DNA2-AuNPs-FC6S；2金电极表面处理：采用铝粉抛光金电极后用超纯水清洗，然后分别在超纯水和无水乙醇中进行超声处理，再用氮气干燥，将处理过的电极放置在pH7.5的KCl和[FeCN6]3-4-混合溶液中，使用循环伏安法测试电极的预处理效果，扫描范围：-0.1～0.6V；扫描速度：100mVs，预处理AuE的CV曲线的峰值电位差低于100mV，进行下一步处理，将5μL的MoS2-rGO滴加在电极表面并在37℃下放置2h；其中所述MoS2-rGO的制备过程为：将30mg氧化石墨烯和0.4g钼酸钠分散到30ml超纯水中，并超声分散30min以获得均匀的混合物，然后向混合溶液中添加0.63g硫脲继续超声分散30min，将所得混合溶液转移到50mL聚四氟乙烯内衬不锈钢高压反应釜中，在180℃下加热12h，待冷却至室温后，用乙醇和超纯水以13000rpmmin离心10min，反复清洗混合物3次，以去除未反应的部分，最后，在65℃下干燥所得混合物，然后将其分散在超纯水中即得到MoS2-rGO分散液；3通过金硫键将适配体组装在电极表面：将5μL的DNA1-AuNPs-Thi和5μL的DNA2-AuNPs-FC6S分别滴加到MoS2-rGOAuE表面，并于36～40℃下孵育2～4h，然后在电极表面滴加5μL的MCH以封闭非特异性结合位点，即可获得适配体传感器。

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