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申请/专利权人:安徽爱宠生物科技有限公司
摘要:本发明公开了一种CPV重组杆状病毒、高效制备方法及其应用,包含重组BS‑GP64‑CPVVP2基因,所述重组BS‑GP64‑CPVVP2基因包括启动子增强元件BS序列、Kozak‑GP64信号肽序列、优化的CPVVP2基因,所述重组杆状病毒用于高效制备犬细小病毒样颗粒疫苗。采用BEVS的qBac系统以同源重组方式构建重组杆状病毒,只需要一次转染即可获得重组病毒,该方法较Bac‑to‑Bac系统简单快捷、可视,且表达量高,通过添加相关启动子增强元件和人工密码子优化,实现了CPVVP2蛋白的高水平、高纯度表达,重组杆状病毒用于高效制备犬细小病毒样颗粒疫苗,使得病毒样颗粒疫苗具有较好的免疫原性,可用于预防犬细小病毒的感染。
主权项:1.一种CPV重组杆状病毒,其特征在于,包含重组BS-GP64-CPVVP2基因,所述重组BS-GP64-CPVVP2基因包括启动子增强元件BS序列、Kozak-GP64信号肽序列、优化的CPVVP2基因;所述启动子增强元件BS序列是多角体启动子中位于TAAG和翻译起始位点之间的一段序列,是极晚期基因表达所必需的,利用重复的BS序列修饰多角体启动子提高外源蛋白的表达水平;所述Kozak-GP64信号肽序列提高外源蛋白的分泌表达和蛋白质修饰;所述优化的CPVVP2基因的编码序列为经过密码子优化、筛选并在C端添加6×His标签序列得到,提高VP2蛋白的表达水平与表达纯度,且利于VP2蛋白的分离和纯化。
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权利要求:
百度查询: 安徽爱宠生物科技有限公司 一种CPV重组杆状病毒、高效制备方法及其应用
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