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申请/专利权人:宁夏大学
摘要:本发明涉及植物组织培养技术领域,公开了一种以下胚轴为外植体的无芒雀麦再生方法,包括以下步骤:将经过消毒处理的无芒雀麦种子接种于萌发培养基上至长出具有胚轴的幼苗,在超净台中,取所得幼苗的小段下胚轴依次进行愈伤组织的诱导、愈伤组织的芽分化、愈伤组织的生根诱导即可炼苗移栽;其中,所述萌发培养基为:以MS4~5gL为基础培养基,附加包括蔗糖30~35gL和植物凝胶3~4gL,pH值为5.7~5.8。本发明建立无芒雀再生体系的各个培养基经过科学有效的配比,极大提高了愈伤组织的诱导率,产生胚性愈伤组织所需时间短、分化时间短、出苗时间短,缩短了获得再生苗的周期,为后续无芒雀麦遗传转化、组培扩繁和脱毒种质研究提供了新的途径。
主权项:1.以下胚轴为外植体的无芒雀麦再生方法,其特征在于,包括以下步骤:将经过预处理的无芒雀麦种子接种于萌发培养基上至长出具有胚轴的幼苗,在超净台中,取所得幼苗的小段下胚轴依次进行愈伤组织的诱导、愈伤组织的芽分化、愈伤组织的生根诱导即可炼苗移栽;其中,所述萌发培养基为:以MS4~5gL为基础培养基,附加蔗糖30~35gL和植物凝胶3~4gL,pH值为5.7~5.8;所述愈伤组织的诱导过程为:在超净台中,取小段下胚轴置于诱导培养基上,并于23~27℃的黑暗培养箱中培养30~35d,其中,所述诱导培养基为:以MS4~5gL为基础培养基,附加2,4-D、6-BA、蔗糖30~35gL和植物凝胶3~4gL,pH值为5.7~5.8,其中,6-BA为0.5mgL时,2,4-D为1.0mgL,6-BA为1.0mgL时,2,4-D为1.0~3.0mgL;所述愈伤组织的芽分化过程为:在超净台中,取诱导后的愈伤组织置于芽分化培养基上培养15~20d,所述芽分化培养基为:以MS4~5gL为基础培养基,附加NAA0.5~2.0mgL、6-BA0.5~2.0mgL、肌醇50~100mgL、水解酪蛋白200~500mgL、蔗糖30~35gL和植物凝胶3~4gL,pH值为5.7~5.8。
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