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申请/专利权人：厦门大学

摘要：本发明公开了一种外泌体PD‑L1糖基化检测方法，包括如下步骤：1用PD‑L1适体即序列PDL1‑S‑T1，标记外泌体PD‑L1；2通过修饰环炔基DBCO的DNA即序列DBCO‑S‑T2，与代谢标记的外泌体表面糖上叠氮的无铜环加成反应标记外泌体的糖；3加入DNA连接臂，所述的连接臂分别具有和序列PDL1‑S‑T1的至少一段互补的序列以及和序列DBCO‑S‑T2的至少一段互补的序列；4加入探针H1和H2，其中，所述的探针H1和探针H2互补，且其中一探针分别具有和序列PDL1‑S‑T1的至少一段互补的序列以及和序列DBCO‑S‑T2的至少一段互补的序列；5扩增，检测扩增信号，得到外泌体PD‑L1糖基化信息。

主权项：1.一种外泌体PD-L1糖基化检测方法，用于非疾病诊断和治疗目的，包括如下步骤：1）用PD-L1适体即序列PDL1-S-T1，标记外泌体PD-L1；所述PDL1-S-T1的序列为GACCCTAAGCATACATCAGCCTAATCGCACTGACGCTAGGTTTTTTTTTTTTTTTTACAGGTTCTGGGGGGTGGGTGGGGAACCTGTT；2）通过修饰环炔基DBCO的DNA即序列DBCO-S-T2，与代谢标记的外泌体表面糖上叠氮的无铜环加成反应标记外泌体的糖；所述DBCO-S-T2序列为TTTTTTTTTTTTTTTCGACATCTAACCTGATTAGGCTGCGTCCTTCAT；3）加入DNA连接臂，所述的连接臂分别具有和序列PDL1-S-T1的至少一段序列互补的序列以及和序列DBCO-S-T2的至少一段序列互补的序列；所述DNA连接臂序列为CTTACAACACCTAGCGTCAGTGCGATCAGGTTAGATGTCG；4）加入探针H1和H2，其中，所述的探针H1和探针H2部分互补，且其中一探针分别具有和序列PDL1-S-T1的至少一段序列互补的序列以及和序列DBCO-S-T2的至少一段序列互补的序列；其中，探针H1标记有FAM和荧光淬灭基团BHQ，序列为ATGAAGGACGATGTATGCTTAGGGTCGACTTCCATAGACCCTAAGCATACAT，探针H2序列为GACCCTAAGCATACATCGTCCTTCATATGTATGCTTAGGGTCTATGGAAGTC；5）扩增，检测扩增信号，得到外泌体PD-L1糖基化信息，所述的扩增为HCR扩增；检测采用荧光检测；所述的荧光检测为FAM探针，序列PDL1-S-T1或DBCO-S-T2上无修饰基团。

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权利要求：

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