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申请/专利权人：苏州普瑞森生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种合成2’‑FL的大肠杆菌及合成2’‑FL的方法，涉及微生物基因工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌中上调2'‑FL从头合成途径上基因manB,ManC,gmd，wcaG，lacY，futC的表达水平，并沉默表达大肠杆菌内源的底物GDP‑L‑岩藻糖合成相关基因、乳糖代谢相关基因以及中间产物GDP‑L‑岩藻糖分解代谢相关基因，同时引入NADPH代谢相关基因，通过精准调控微生物合成代谢中内关键酶的辅因子从而提升GDP‑L‑岩藻糖的产量，进而显著提升2’‑岩藻糖基乳糖的产量达到3.9gL，具备良好的工业应用前景。
主权项：1.一种合成2’-岩藻糖基乳糖的大肠杆菌，其特征在于，所述大肠杆菌沉默表达大肠杆菌内源的底物GDP-L-岩藻糖合成相关基因、乳糖代谢相关基因以及中间产物GDP-L-岩藻糖分解代谢相关基因；所述底物GDP-L-岩藻糖合成相关基因包括：GDP-甘露糖水解酶基因nudK、GDP-甘露糖基水解酶nudD和poxB基因；所述乳糖代谢相关基因选自β-半乳糖苷酶基因lacZ；所述GDP-L-岩藻糖分解代谢相关基因选自UDP-葡萄糖脂质载体转移酶基因wcaJ和lon基因；加强表达磷酸甘露糖变位酶编码基因ManB、甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶编码基因ManC、GDP-甘露糖-6-脱氢酶编码基因Gmd、GDP-岩藻糖合成酶编码基因WcaG、2’-岩藻糖基乳糖合成酶编码基因FutC、β-半乳糖苷透性酶编码基因lacY、并加强表达NADPH及其前体NADP+代谢相关基因；所述NADPH及其前体NADP+代谢相关基因为NAD激酶基因nadK、异柠檬酸NAD+脱氢酶基因Icd、苹果酸酶基因MaeB、可溶性吡啶核苷酸转移酶编码基因sthA、6-葡萄糖磷酸脱氢酶基因zwf和6-葡萄糖酸磷酸脱氢酶基因gnd。
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