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摘要:本发明涉及干细胞检测技术领域,特别是涉及一种脐带间充质干细胞hUC‑MSCs的检测方法。提取脐带间充质干细胞hUC‑MSCs的RNA,反转录为cDNA,将得到的cDNA进行PCR扩增,得到扩增产物,将所述步骤2得到的扩增产物进行电泳检测。核酸电泳具有高效性、灵敏度高、分辨率高等特点,本方案采取核酸电泳对SSEA‑4、NANOG、OCT‑4、SOX2四个基因进行检测,可以在短时间内将其按核酸分子大小不同进行高效的分离和检测。
主权项:1.一种脐带间充质干细胞hUC-MSCs的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1提取脐带间充质干细胞hUC-MSCs的RNA,反转录为cDNA;2将所述步骤1得到的cDNA进行PCR扩增,得到扩增产物;扩增SSEA-4因子使用的引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示;扩增OCT-4因子使用的引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示,下游引物的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示;扩增SOX-2因子使用的引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示,下游引物的核苷酸序列如SEQIDNo.6所示;扩增NANOG因子使用的引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNo.7所示,下游引物的核苷酸序列如SEQIDNo.8所示;3将所述步骤2得到的扩增产物进行电泳检测,当所述扩增产物的扩增长度为121bp时,脐带间充质干细胞hUC-MSCs旁分泌SSEA-4因子;当所述扩增产物的扩增长度为137bp时,脐带间充质干细胞hUC-MSCs旁分泌OCT-4因子;当所述扩增产物的扩增长度为171bp时,脐带间充质干细胞hUC-MSCs旁分泌SOX-2因子;当所述扩增产物的扩增长度为94bp时,脐带间充质干细胞hUC-MSCs旁分泌NANOG因子。
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