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高表达白蛋白的hWJ-MSCs肝细胞体外诱导体系、诱导培养方法及应用 

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摘要:本发明提供了高表达白蛋白的hWJ‑MSCs肝细胞体外诱导体系、诱导培养方法及应用,用于体外诱导hWJ‑MSCs细胞分化为肝成熟细胞,包含基础培养基以及与该基础培养基分别组合使用的内胚层细胞诱导分化因子、肝前体细胞诱导分化因子、肝成熟细胞诱导分化因子。其中,基础培养基为无血清IMDM培养基;内胚层细胞诱导分化因子包括EGF、FGF2、丁酸钠和Wnt信号通路激动剂;肝前体细胞诱导分化因子包含FGF2、HGF和ITS‑X,肝成熟细胞诱导分化因子包含抑瘤素M、地塞米松和ITS‑X。使用本发明的化学成份明确的体外诱导体系对第4代hWJ‑MSCs细胞进行诱导后,细胞形态呈现成熟肝细胞典型的双核特征,表达上皮细胞和成熟肝细胞基因,并且具备一定生理功能的成熟肝细胞,特别是白蛋白显著高表达。该诱导方案为获取用于细胞治疗的肝细胞提供了新的思路,且重复性好。

主权项:1.一种高表达白蛋白的hWJ-MSCs肝细胞体外诱导体系,其特征在于,用于体外诱导hWJ-MSCs细胞分化为肝成熟细胞,包含基础培养基以及与该基础培养基分别组合使用的内胚层细胞诱导分化因子、肝前体细胞诱导分化因子、肝成熟细胞诱导分化因子,所述内胚层细胞诱导分化因子包括0.1~5mM丁酸钠;10~50ngmLEGF、0.5~30ngmLFGF2,1~5μMWnt信号通路激动剂;所述肝前体细胞诱导分化因子包含0.5~30ngmLFGF2、1~100ngmLHGF和1~5%ITS-X;所述肝成熟细胞诱导分化因子包含1~50ngmL抑瘤素M,1×10-9~1×10-6molL地塞米松和1~5%ITS-X。

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百度查询: 中国人民解放军海军军医大学 高表达白蛋白的hWJ-MSCs肝细胞体外诱导体系、诱导培养方法及应用

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