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摘要:本发明涉及干细胞检测技术领域,特别是涉及一种脐带间充质干细胞hUC‑MSCs纯度和群体倍增时间的测定方法。将培养得到的脐带间充质干细胞hUC‑MSCs与缓冲液混合,得到细胞悬液;将细胞悬液与带荧光标记的抗体混合、孵育,得到孵育物;将孵育物离心,将得到的沉淀清洗,再与缓冲液混合,得到待检测物等。本发明利用流式细胞仪和对脐带间充质干细胞标记不同荧光素的单克隆抗体及PI染色,对细胞表面标志物及细胞周期进行分析,进一步确定了脐带间充质干细胞的纯度及群体倍增时间的检测方法。
主权项:1.一种脐带间充质干细胞hUC-MSCs纯度和群体倍增时间的测定方法,其特征在于,包括以下步骤:1将培养得到的脐带间充质干细胞hUC-MSCs与缓冲液混合,得到细胞悬液;2将所述步骤1得到的细胞悬液与带荧光标记的抗体混合、孵育,得到孵育物;3将所述步骤2得到的孵育物离心,将得到的沉淀清洗,再与缓冲液混合,得到待检测物,将所述代检测物检测细胞阳性表达比率;4将培养得到的脐带间充质干细胞hUC-MSCs与缓冲液、乙醇溶液混合,固定后得到固定物;5将所述步骤4得到的固定物离心,将得到的沉淀与PI工作液混合、孵育、离心,将得到的沉淀清洗后,再与缓冲液混合,使用MulticycleforDNA软件分析群体倍增时间;所述步骤1~3与步骤4~5之间无时间顺序限定。
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百度查询: 圣释(北京)生物工程有限公司 一种脐带间充质干细胞hUC-MSCs纯度和群体倍增时间的测定方法
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