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摘要：本发明涉及干细胞检测技术领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞hUC‑MSCs干性基因蛋白表达水平的定性检验方法。本发明利用鼠或兔源抗人SSEA‑4、OCT‑4、SOX‑2和NANOG的单克隆抗体McAb或多克隆抗体PcAb与脐带间充质干细胞反应，洗去未结合McAbPcAb，如使用PcAb则用带荧光的二抗进行染色，经反应并洗涤后，荧光显微镜下观察荧光强度来判断抗原的表达情况。定性检测脐带间充质干细胞的干性基因蛋白表达水平，把控间充质干细胞的质量。
主权项：1.一种脐带间充质干细胞hUC-MSCs干性基因蛋白表达水平的定性检验方法，其特征在于，包括以下步骤：1将脐带间充质干细胞接种于细胞培养板内培养，待细胞达到30～50％汇合时，弃去培养基、润洗，得到润洗培养板；2将所述步骤1得到的润洗培养板使用多聚甲醛固定、润洗，得到固定培养板；3将所述步骤2得到的固定培养板使用TritonX-100进行透膜处理、润洗，得到透膜培养板；4将所述步骤3得到的透膜培养板使用山羊血清封闭，弃去液体加入干性基因的抗体进行避光孵育、润洗后，加入二抗后进行孵育、润洗，得到孵育培养板；5将所述步骤4得到的孵育培养板进行核染、避光孵育，清洗后加入缓冲液，进行荧光显微观察；所述干性基因包括SSEA-4基因、OCT-4基因、SOX-2基因和NANOG基因中的一种或多种。
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百度查询： 圣释(北京)生物工程有限公司 一种脐带间充质干细胞hUC-MSCs干性基因蛋白表达水平的定性检验方法
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