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一种检测Cd2+的电化学发光适配体传感器制备方法及其应用 

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申请/专利权人:江苏大学

摘要:本发明属于生物传感检测领域,涉及一种检测Cd2+的电化学发光适配体传感器制备方法及其应用。本发明首先制备了PTCA‑COF和AuNCs两种材料,通过逐层修饰的方式,依次修饰到处理后的玻碳电极表面;同时,引入特异性识别元件Cd2+的适配体,基于适配体上连接的Fc对于电化学发光信号的猝灭作用,构建了基于PTCA‑COFAuNCs的电化学发光适配体传感器;其以PTCA‑COF作为基底材料,增强发光体AuNCs的电化学发光信号;所构建的传感器具有对目标物Cd2+优异的检测分析性能,线性范围为1.0×10‑12‑5.0×10‑9M,检测限为6.6×10‑13M,具有灵敏度高、选择性及可靠性好的优势。

主权项:1.一种检测Cd2+的电化学发光适配体传感器制备方法,其特征在于,包含步骤如下:1PTCA-COF的制备:首先,将苝四甲酸二酐和三聚氰胺混合研磨,得到研磨混合物;将所得研磨混合物进行煅烧,随后冷却至室温,取出煅烧产物,经洗涤、离心处理后,收集沉淀再进行干燥,得到干燥后的固体粉末,记为PTCA-COF;2AuNCs的制备:首先,称取6-氮杂-2硫代胸腺嘧和氢氧化钠,加入超纯水溶解,得到含有NaOH的ATT溶液;然后称取氯金酸加入超纯水中溶解,得到HAuCl4溶液;将含有NaOH的ATT溶液与HAuCl4溶液混合,搅拌均匀后进行避光反应,得到黄色溶液;再将黄色溶液进行透析,将透析后的溶液进行冷冻干燥,冷冻干燥后所得粉末状固体即为AuNCs;3Fc-Apt-CP的制备:修饰有Fc的Cd2+适配体溶液记为Fc-Apt,Cd2+适配体互补链溶液记为CP;将Fc-Apt与CP混合,混合溶液经变性退火后合成DNA双链,得到的产物标记为Fc-Apt-CP;4将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨、抛光,然后依次在水、乙醇、丙酮和水中超声清洗并在空气中晾干,得到处理后的玻碳电极;5将步骤1制备得到的PTCA-COF分散于超纯水中,得到PTCA-COF溶液,然后将PTCA-COF溶液滴加到处理后的玻碳电极表面,于室温下晾干,得到的产品标记为PTCA-COFGCE;6将步骤2制备得到的AuNCs溶于超纯水中,得到AuNCs溶液;并将AuNCs溶液滴加到步骤5所得PTCA-COFGCE表面,于室温下晾干,得到的产品标记为AuNCsPTCA-COFGCE;7将步骤3制备得到的Fc-Apt-CP滴加在步骤6得到的AuNCsPTCA-COFGCE表面,经孵育后再使用Tris-HCl缓冲溶液淋洗,淋洗后得到的产品标记为Fc-Apt-CPAuNCsPTCA-COFGCE;8在步骤7制备的Fc-Apt-CPAuNCsPTCA-COFGCE电极表面修饰短链DNA溶液,经孵育后再使用Tris-HCl缓冲溶液淋洗,淋洗后得到的即为电化学发光适配体传感器,标记为ssDNAFc-Apt-CPAuNCsPTCA-COFGCE。

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权利要求:

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