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申请/专利权人：河南恩诺农业科技有限公司;河南省高新技术实业有限公司

摘要：本发明涉及植物调节剂技术领域，尤其涉及一种从油菜花粉中提取天然植物调节剂的方法，包括以下步骤：步骤S1：将采集到的油菜花粉进清洗除杂质；步骤S2：油菜花粉预处理：超声破碎；利用超声波破碎法破碎油菜花粉；步骤S3：利用表面活性剂对色素蛋白进行溶剂增溶提取，通过在溶剂中浸泡油菜花粉，使其活性成分溶解于溶剂中；步骤S4：提取物进行浓缩，以去除杂质和浓缩活性成分；步骤S5：利用DEAE阴离子交换层析及SephadexG‑50凝胶过滤层析进一步分离纯化；最后经过干燥，得到天然植物调节剂；本发明，利用油菜花粉进行提取，避免了对其他植物的依赖，降低了成本；提取效果高，提高了植物调节剂的纯度；适用范围广，有效提高资源利用率。

主权项：1.一种从油菜花粉中提取天然植物调节剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1：将采集到的油菜花粉进清洗除杂质；首先以wv1:1-3加入蒸馏水，在5000-6000rmin下离心10-30分钟，进行清洗，收集沉淀；步骤S2：油菜花粉预处理：超声破碎；利用超声波破碎法破碎油菜花粉；清洗后以wv1:1-4加入10-50mM、pH6.0-7.5的缓冲液，混匀后在冰水浴中进行超声波破碎，超声条件为功率600W-1500W，超声时间10-50分钟，运行2s，间歇3s，破碎后在5000-6000rmin下离心10-20分钟，去除未破碎细胞，上清液在4-10℃、10000-15000rmin下离心30-40分钟，收集沉淀；沉淀烘干；步骤S3：利用表面活性剂对色素蛋白进行溶剂增溶提取，通过在溶剂中浸泡油菜花粉，使其活性成分溶解于溶剂中；用wv1:1-4的乙醇等溶剂，加入表面活性剂使终浓度质量分数达到0.5％-1.5％，常温下缓慢搅拌避光增溶12-18h后，10000-15000rmin离心30-40min；步骤S4：提取物进行浓缩，以去除杂质和浓缩活性成分；步骤S5：利用DEAE阴离子交换层析及SephadexG-50凝胶过滤层析进一步分离纯化；最后经过干燥，得到天然植物调节剂；溶液上样到DEAE阴离子交换色谱柱上，用含0-1MNaCl的上述缓冲液进行梯度洗脱，流速为15-16mL10min，在205nm波长下测定样品吸光值，收集A205比值较大的组分，经过超滤浓缩后，上样到预先用10-50mM、pH6.0-7.5，含20mMNaCl缓冲液平衡好的SephadexG-50凝胶过滤色谱，相同缓冲液进行洗脱，流速为10.0-15.0mL10min，在205nm波长下测定样品吸光值，收集溶液进行真空干燥即为产品。

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