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申请/专利权人：吉林大学
摘要：本发明公开了一种悬滴式培养大鼠睾丸组织类器官方法，涉及组织培养领域。包括如下步骤：步骤一、获取大鼠幼仔睾丸组织，两步酶消化法得到睾丸细胞；步骤二、用完全培养基重悬睾丸细胞，得到的睾丸细胞悬液计数后滴在培养皿盖上，34‑37℃下悬滴培养24‑48h，得到聚合睾丸细胞的细胞团；步骤三、将步骤二得到的含有细胞团的悬滴液吸入EP管中，离心，弃上清，得细胞沉淀；步骤四、在有细胞沉淀的EP管中加入基质胶，吹打混匀；步骤五、取含有细胞团的基质胶，滴到24孔板小室中央，盖上皿盖倒置，4℃冰箱孵育10min，37℃培养箱中10min，使基质胶凝固；步骤六、在步骤五凝固后的孔板中加入完全培养基，34‑37℃培养。该构建方法所得到的睾丸类器官与体内睾丸相似，该睾丸类器官中存在各类体细胞支持细胞、间质细胞；采用本发明提供的构建方法，可以得到在体外能够模拟体内微环境的睾丸类器官。
主权项：1.一种悬滴式培养大鼠睾丸组织类器官方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、获取大鼠幼仔睾丸组织，两步酶消化法得到睾丸细胞；步骤二、用完全培养基重悬睾丸细胞，得到的睾丸细胞悬液计数后滴在培养皿盖上，34-37℃下悬滴培养24-48h，得到聚合睾丸细胞的细胞团；步骤三、将步骤二得到的含有细胞团的悬滴液吸入EP管中，离心，弃上清，得细胞沉淀；步骤四、在有细胞沉淀的EP管中加入基质胶，吹打混匀；步骤五、取含有细胞团的基质胶，滴到24孔板小室中央，盖上皿盖倒置，4℃冰箱孵育10min，37℃培养箱中10，min，使基质胶凝固；步骤六、在步骤五凝固后的孔板中加入完全培养基，34-37℃培养。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 吉林大学 一种悬滴式培养大鼠睾丸组织类器官方法
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