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申请/专利权人:湖北科技学院;咸宁市艾小北生物科技有限责任公司
摘要:本发明公开了一种桂花果皮黑色素的分步酶解提取方法及其应用,该方法包括将桂花果皮粉碎、分步酶解、离心、上清液纯化、沉淀物纯化、减压浓缩、冷冻干燥。本发明通过缓冲液调节pH分步酶解,在微酸性环境下木质素过氧化物酶、纤维素酶、果胶酶表现出较高的活性,在微碱性环境下脱聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶表现出较高的活性,通过柱层析法和溶剂浸提法分步纯化了酶解液离心后的上清液和沉淀,使得黑色素得到充分提取,提取率和纯度均显著提升。采用本发明方法从桂花果皮中提取的黑色素可用于化妆品添加剂。
主权项:1.一种桂花果皮黑色素的分步酶解提取方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、粉碎:将干净的桂花果皮微波干燥,用磨粉机粉碎,得桂花果皮细粉;S2、酶解:桂花果皮细粉中加入去离子水,添加缓冲液,调节pH至5.5-6.5,添加复合酶剂1,进行酶解,调节pH至7-8再添加复合酶剂2,继续酶解,得酶解液,进行离心,得到上清液和沉淀物;S3、上清液纯化:将上清液加载到层析柱上,采用梯度洗脱,收集洗脱后的黑色素;S4、沉淀物纯化:采用氢氧化钠乙醇溶液对沉淀物进行浸提,浸提后得到浸提产物,将所述浸提产物进行离心,得到上清液和沉淀物;S5、将S3所得洗脱后的黑色素与S4上清液合并后减压浓缩至膏稠状;S6、冷冻干燥:将S5所得膏稠状洗黑色素置于冷冻干燥机中冷冻干燥得黑色素纯品。
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