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一种快速提取水菜花浮水叶原生质体的方法 

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申请/专利权人:海南大学

摘要:本发明公开了一种快速提取水菜花浮水叶原生质体的方法,属于植物分子细胞生物学技术领域,所述快速提取水菜花浮水叶原生质体的方法,包括以下步骤:水菜花浮水叶水洗,切成小叶块,于浸泡于甘露醇溶液的状态下,切成叶丝;叶丝与酶解液混合,避光酶解处理,然后加入W5溶液,细胞筛过滤,滤出液第一离心处理,得初提物;初提物与W5溶液混合,重悬,第二离心处理,重复处理2次,得原生质体粗提物;原生质体粗提物与W5溶液混合,冰上放置20~40min,第三离心处理,弃上清,得原生质体,原生质体重悬于MMG溶液中。本发明利用纤维素酶R10和果胶酶R10降解细胞壁,并使用甘露醇作为渗透物质,保持了制备所得原生质体的完整性。

主权项:1.一种快速提取水菜花浮水叶原生质体的方法,其特征在于,包括以下步骤:1水菜花浮水叶水洗,切成小叶块,所述小叶块于浸泡于甘露醇溶液的状态下,切成叶丝;2步骤1所述叶丝与酶解液混合,避光酶解处理1~1.5h,然后加入W5溶液,细胞筛过滤,滤出液第一离心处理,得初提物;3步骤2所述初提物与W5溶液混合,重悬,第二离心处理,重复处理2次,得原生质体粗提物;4步骤3所得原生质体粗提物与W5溶液混合,冰上放置20~40min,第三离心处理,弃上清,得原生质体,所述原生质体重悬于MMG溶液中。

全文数据:

权利要求:

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