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申请/专利权人:华南理工大学
摘要:本发明公开了一种制备环状单链DNA的方法,包括:提供环状双链DNA分子作为模板;将Cas9切口酶、sgRNA和环状双链DNA混合得到起始反应体系反应,在所述双链DNA分子的任意一条链上引入切口,所述sgRNA靶向所述环状双链DNA分子任意一条链上的切割位点;使Cas9切口酶和sgRNA复合物脱离所述环状双链DNA分子;将核酸外切酶与一条链上引入切口的环状双链DNA分子混合得到消化反应体系,反应得到环状单链DNA,本发明的环状单链DNA制备方法,具有普适性、无序列限制、操作简单,具有良好的应用前景。
主权项:1.一种制备环状单链DNA的方法,包括:提供环状双链DNA分子作为模板;将Cas9切口酶、sgRNA和环状双链DNA混合得到起始反应体系反应,在所述双链DNA分子的任意一条链上引入切口,所述sgRNA靶向所述环状双链DNA分子任意一条链上的切割位点,所述切割位点数目为N个,N为不小于1的整数;使Cas9切口酶和sgRNA复合物脱离所述环状双链DNA分子;将核酸外切酶与一条链上引入切口的环状双链DNA分子混合得到消化反应体系,反应得到环状单链DNA。
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权利要求:
百度查询: 华南理工大学 一种通用制备环状单链DNA的方法
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