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申请/专利权人：广东石油化工学院

摘要：一种基于磷掺杂还原性氧化石墨烯‑氯化血红素‑钯纳米复合材料和磷掺杂还原性氧化石墨烯‑氧化亚铜‑钯纳米复合材料构建联合检测GPC3AFP的电化学夹心型双适配体传感器，以具有大比表面积、高电导率、稳定电化学活性和优良生物相容性的PrGO‑Hemin‑Pd和PrGO‑Cu2O‑Pd为载体，分别与GPC3Apt和AFPApt偶联形成信号探针，与待测物质形成夹心结构，并将夹心结构稳定的固定在电极表面，通过DPV法记录Hemin与Cu2O的氧化峰值电流变化，从而实现对GPC3AFP的检测。该方法成本低、选择性好，灵敏度高，最低检测限分别为0.13pgmL和0.34pgmL。

主权项：1.一种基于磷掺杂还原性氧化石墨烯-氯化血红素-钯纳米复合材料PrGO-Hemin-PdNPs和磷掺杂还原性氧化石墨烯-氧化亚铜-钯纳米复合材料PrGO-Cu2O-PdNPs构建联合检测GPC3AFP的电化学夹心型双适配体传感器，按以下步骤进行：步骤1：磷掺杂还原性氧化石墨烯-氯化血红素-钯-GPC3适配体PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt和磷掺杂还原性氧化石墨烯-氧化亚铜-钯-AFPApt-PrGO-Cu2O-Pd-AFPApt信号探针的制备1磷掺杂还原性氧化石墨烯PrGO的制备：将氧化石墨烯GO溶于水中，超声破碎得到氧化石墨烯GO溶液，将GO溶液与一水合次亚磷酸钠NaH2PO2·H2O混合均匀，进行水热反应，冷却；并将产生的沉淀离心、洗涤，得到PrGO；2磷掺杂还原性氧化石墨烯-氯化血红素PrGO-Hemin的制备：将氯化血红素Hemin溶于超纯水和氨水NH3·H2O中，得Hemin溶液；然后将PrGO溶液和Hemin溶液混合；在混合溶液中加入水合肼，水浴反应，得到PrGO-Hemin纳米材料；3磷掺杂还原氧化石墨烯-氯化血红素-钯纳米复合材料PrGO-Hemin-PdNPs的制备：取所得PrGO-Hemin纳米材料加入次氯钯酸钠Na2PdCl6和水合肼，离心、洗涤干燥，得到PrGO-Hemin-Pd固体；4氧化亚铜Cu2O的制备：取CuNO32粉末和聚乙烯吡咯烷酮PVP溶解于超纯水中，加入NaOH搅拌，溶液由无色变为蓝色；将水合肼溶液加入到混合溶液中，搅拌、离心、洗涤，得到Cu2O溶液；5磷掺杂还原性氧化石墨烯-氧化亚铜PrGO-Cu2O的制备：将PrGO溶液和Cu2O溶液混合，搅拌，得到PrGO-Cu2O混合溶液，将混合溶液置于烘箱中烘干，得到PrGO-Cu2O固体；6磷掺杂还原氧化石墨烯-氧化亚铜-钯PrGO-Cu2O-Pd纳米复合材料的制备：取PrGO-Cu2O溶液加入Na2PdCl6和水合肼，搅拌后用水和乙醇离心、洗涤，得到PrGO-Cu2O-Pd混合溶液，干燥，得到PrGO-Cu2O-Pd固体；7磷掺杂还原氧化石墨烯-氯化血红素-钯-GPC3适配体和磷掺杂还原氧化石墨烯-氧化亚铜-钯-AFP适配体PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt和PrGO-Cu2O-Pd-AFPApt信号探针的制备：PrGO-Hemin-PdNPs与GPC3Apt、PrGO-Hemin-PdNPs与AFPApt震荡混匀，孵育；加入BSA溶液，进行封闭，常温孵育；离心，除去上清液，重新分散在超纯水中，得到PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt和PrGO-Cu2O-Pd-AFPApt混合信号探针；步骤3：GPC3AFP的工作曲线绘制1将GPC3AFP标准液滴加到步骤2得到的电化学适配体传感器中，孵育、清洗、干燥，得到HpGPC3AFPMAAu@POPDNPsSPE工作电极；2将工作电极放入磷酸缓冲盐溶液PBs中，采用电化学工作站的差分脉冲伏安法DPV扫描，记录其峰电流；3分别对不同浓度的GPC3AFP进行检测，记录峰值电流；根据传感器的电流响应值与GPC3和AFP浓度的关系，绘制工作曲线，计算出该方法的最低检测限；步骤4：实际血清样本中GPC3的检测1在步骤2得到的电化学适配体传感器上，滴加待测实际血清样本，孵育、清洗、干燥、得到工作电极；2将工作电极放入PBs溶液中，采用电化学工作站的DPV扫描，记录峰电流；3根据步骤3所述的工作曲线，计算求出所述待测实际样品中GPC3和AFP的浓度。

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