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一种重组肿瘤坏死因子的生产方法 

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申请/专利权人:上海唯科生物制药有限公司

摘要:本发明公开了一种重组肿瘤坏死因子的生产方法,包括:1构建含有卡那霉素抗性肿瘤坏死因子的重组表达载体;2构建含有重组表达载体的工程菌;3将工程菌进行一级种子培养、二级种子培养和发酵培养,得到发酵液菌体;4将发酵液菌体破碎,分级沉淀蛋白,纯化,得到重组肿瘤坏死因子。本发明的肿瘤坏死因子表达载体中采用卡那霉素基因作为抗性基因,质粒稳定性提高,质粒丢失率为0,同时改进了发酵方法,纯化方法,发酵时质粒稳定表达,肿瘤坏死因子的产量有显著提高,纯化后肿瘤坏死因子的活性提高,提高了产品的安全性。

主权项:1.一种重组肿瘤坏死因子的生产方法,其特征在于,包括:1构建含有卡那霉素抗性肿瘤坏死因子的重组表达载体;2构建含有重组表达载体的工程菌;3将工程菌进行一级种子培养、二级种子培养和发酵培养,得到发酵液菌体;4将发酵液菌体破碎,分级沉淀蛋白,纯化,得到重组肿瘤坏死因子。

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