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申请/专利权人：山东信得科技股份有限公司
摘要：本发明提供了一种番鸭细小VP2的亚单位抗原的制备方法及制备番鸭细小病毒VP2亚单位疫苗的应用，制备方法包括1对MDPV流行毒株的VP2基因进行序列优化并合成，获得表达的VP2基因序列；2先用VP2基因替换DnaK+DnaJ+GrpE基因片段，在GroESGroEL基因后加入Tig基因序列，构建重组表达质粒命名为pG‑VP2‑SLT；3将pG‑VP2‑SLT转化EcoliBL21DE3,获得能够共同表达VP2蛋白、GroELGroES和Tig伴侣蛋白的重组表达菌；4优化表达条件对重组表达菌进行诱导表达，将获得的VP2蛋白溶液纯化后，获得番鸭细小VP2亚单位抗原。本发明的番鸭细小VP2的亚单位抗原的制备方法及制备番鸭细小病毒VP2亚单位疫苗的应用解决了相关技术中番鸭细小VP2蛋白在原核表达系统中不可溶，限制了亚单位抗原在疫苗制备中应用的技术问题。
主权项：1.一种番鸭细小VP2的亚单位抗原的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：1表达用目的基因的获取：对MDPV流行毒株的VP2基因进行序列优化并合成，设计优化后的VP2序列上下游扩增引物，PCR扩增后，获得表达的VP2基因序列；2表达质粒的改造构建：先用VP2基因替换DnaK+DnaJ+GrpE基因片段，在GroESGroEL基因后加入Tig基因序列，构建重组表达质粒，重组表达质粒命名为pG-VP2-SLT；3重组表达菌的构建：将pG-VP2-SLT重组质粒转化EcoliBL21DE3,获得能够共同表达VP2蛋白、GroELGroES和Tig伴侣蛋白的重组表达菌；4重组表达菌进行诱导表达：优化重组表达菌的表达条件，将所述重组表达菌进行诱导表达，获得VP2蛋白溶液，将VP2蛋白溶液纯化后，获得用于制备番鸭细小亚单位疫苗的VP2亚单位抗原。
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百度查询： 山东信得科技股份有限公司 番鸭细小VP2的亚单位抗原的制备方法及制备番鸭细小病毒VP2亚单位疫苗的应用
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