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基于上转换纳米颗粒的超分辨三维定位与追踪方法 

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申请/专利权人:南京理工大学

摘要:本发明公开了一种基于上转换纳米颗粒的超分辨三维定位与追踪方法,利用共聚焦宽场荧光系统的近红外光激发置于具有特征厚度的二氧化硅层镜面衬底上的上转换纳米颗粒,实现荧光的自干涉。对采集的与轴向位置相关的远场点扩散函数图像进行分析,实现特征函数的轴向信息有效编码。结合交叉验证综合评估方法,从共聚焦宽场图像中提取特征值进行轴向信息解码,提取单纳米颗粒的轴向超分辨位置的精确信息,进而实现上转换纳米颗粒的超分辨三维定位与追踪。本发明在一帧宽场图像下同时实现纳米颗粒的横向与轴向超分辨定位,实时距离传感的定位精度可达2.8nm,解决了现有的单分子定位技术分辨率各向异性以及光学定位方法受离焦影响大的问题,具有追踪活细胞或生物器官中快速运动的生物分子的能力。

主权项:1.一种基于上转换纳米颗粒的超分辨三维定位与追踪方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:制备一系列具有不同特征厚度的二氧化硅层衬底的样片;步骤2:搭建共聚焦宽场荧光系统;步骤3:利用共聚焦宽场荧光系统实现上转换纳米颗粒的荧光自干涉,并采集多个具有不同厚度的二氧化硅层衬底的样片的超分辨显微图像;步骤4:提取点扩散函数图像的特征值进行轴向信息编码,建立评估函数;步骤5:提取特征值进行轴向信息解码,实现上转换纳米颗粒的三维定位。

全文数据:

权利要求:

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