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申请/专利权人：宝天生物科技(上海)有限公司
摘要：本发明公开了一种从包涵体中提取霍乱毒素B亚基的方法，将用尿素溶液溶解的含有CTB的包涵体的蛋白样品装入处理好的1kDa的透析袋中；将透析袋置于盛有含尿素的透析液的透析烧杯中，透析烧杯置于磁力搅拌器上，将整个透析烧杯和磁力搅拌器置于冷藏柜中，透析2h；然后在冷藏柜中放入蠕动泵和盛有透析补充液的备用烧杯，所述蠕动泵将透析补充液定时定量地加入所述含尿素的透析液中，观察透析袋中溶液性状，持续透析直至透析袋中出现絮状CTB蛋白沉淀，透析复性结束。本发明的从包涵体中提取霍乱毒素B亚基的方法，极大地节约了透析复性时所耗费的时间成本和人力成本，并且最终的复性效果好，获得的CTB蛋白浓度高，含量大。
主权项：1.一种从包涵体中提取霍乱毒素B亚基的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，将用尿素溶液溶解的含有CTB的包涵体的蛋白样品装入处理好的1kDa的透析袋中；S2，将透析袋置于盛有含尿素的透析液的透析烧杯中，透析烧杯置于磁力搅拌器上，将整个透析烧杯和磁力搅拌器置于冷藏柜中，透析2h，透析过程中磁力搅拌器持续搅拌保持透析液的均一性；所述透析液中尿素浓度为4～5molL；S3，然后在冷藏柜中放入蠕动泵和盛有透析补充液的备用烧杯，所述蠕动泵的输出管插入所述透析烧杯的含尿素的透析液中，输入管插入所述备用烧杯的透析补充液中，所述蠕动泵将透析补充液定时定量地加入所述含尿素的透析液中，保证50-68h后透析液中的尿素浓度低于2molL，观察透析袋中溶液性状，持续透析直至透析袋中出现絮状CTB蛋白沉淀，透析复性结束；透析过程中磁力搅拌器持续搅拌保持透析液的均一性。
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