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申请/专利权人：东莞市东南部中心医院

摘要：本发明具体涉及一种负载富血小板血浆和脐带间充质干细胞球的可注射水凝胶系统及其制备方法和应用，首先通过海藻酸钠、葡萄糖酸钙、氯化钙和水制得的水凝胶，再将人脐带血富血小板血浆和人脐带间充质干细胞球负载于水凝胶中制得该可注射水凝胶系统。其中，利用微球的三维多孔结构为人脐带充质干细胞球的生长提供了空间和支撑，形成人脐带充质干细胞球；再者利用人脐带血富血小板血浆中含有多种生长因子，能够抑制炎症水平，促进人脐带间充质干细胞向软骨分化，从而改善关节软骨损伤的病理微环境，促进关节软骨损伤的修复。本发明所述可注射水凝胶系统具有良好的临床应用实践及前景，能够为关节软骨损伤的治疗和恢复提供新思路和途径。

主权项：1.一种负载富血小板血浆和脐带间充质干细胞球的可注射水凝胶系统，其特征在于：包括水凝胶、人脐带血富血小板血浆和人脐带间充质干细胞球；所述负载富血小板血浆和脐带间充质干细胞球的可注射水凝胶系统的制备方法，其特征在于：包括如下制备步骤：步骤一，水凝胶溶解与混合：在室温下，按比例取海藻酸钠、葡萄糖酸钙和氯化钙分别溶解于超纯水中，静置12~24h，再根据海藻酸钠、葡萄糖酸钙和氯化钙的质量比为15~25:3~6:0.5~2，将三者静置后得到的溶液进行充分混合得到混合液，然后在2~4℃下静置2~4h，得到半透明液态物；步骤二，水凝胶中加入人脐带血富血小板血浆：加入PBS调节人脐带血富血小板血浆中的血小板浓度为1000*109L，在室温下，根据每毫升水凝胶中加入50~100微升人脐带血富血小板血浆的比例将人脐带血富血小板血浆与步骤一得到的半透明液态物进行混合搅拌，得到第二混合液；步骤三，微球和人脐带间充质干细胞球的制备：（1）取1~5g明胶溶于10~15毫升超纯水中配置成明胶溶液；（2）取80~120毫升液体石蜡，加入1~2gSpan80，在40~50℃温度下搅拌均匀，再向其中加入配置好的明胶溶液继续搅拌，观察生成明胶微球，用丙酮洗涤后，用10%~15%戊二醛交联，再用超纯水洗涤后，液氮速冻，然后用冻干机冻干，即得到所述微球；（3）向每1~5mg微球中加入10万个人脐带间充质干细胞，使用干细胞球培养基培养22~26h，即得到所述人脐带间充质干细胞球；步骤四，人脐带间充质干细胞球加入到水凝胶中：在室温下，根据每毫升第二混合液中加入1~5mg人脐带间充质干细胞球的比例将在步骤三得到的人脐带间充质干细胞球加入到步骤二得到的第二混合液中进行混合，搅拌均匀后，即得到所述可注射水凝胶系统。

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