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申请/专利权人：广东省大湾区华南理工大学聚集诱导发光高等研究院;广州艾格科技发展有限公司

摘要：本发明提供一种心肌肌钙蛋白I免疫层析检测卡、试剂盒及其应用，所述心肌肌钙蛋白I免疫层析检测卡包括试纸条，所述试纸条由底板和底板上依次粘贴的样品垫、第一结合垫、第二结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成；所述第一结合垫结合有生物素标记的cTnI抗体1#和生物素标记的cTnI抗体2#；所述第二结合垫结合有AIE荧光微球标记的cTnI抗体3#和AIE荧光微球标记的二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物；所述cTnI抗体1#、cTnI抗体2#和cTnI抗体3#识别cTnI抗原的位点不重合。本发明采用2种生物素化抗体结合1种AIE荧光抗体的模式，有助于提高检测卡准确度。

主权项：1.一种心肌肌钙蛋白I免疫层析检测卡，其特征在于，所述心肌肌钙蛋白I免疫层析检测卡包括试纸条，所述试纸条由硬质底板和硬质底板上依次粘贴的样品垫、第一结合垫、第二结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成；所述第一结合垫结合有生物素标记的cTnI抗体1#和生物素标记的cTnI抗体2#；所述第二结合垫结合有AIE荧光微球标记的cTnI抗体3#和AIE荧光微球标记的二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物；所述cTnI抗体1#、cTnI抗体2#和cTnI抗体3#识别cTnI抗原的位点不重合；所述cTnI抗体1#为购自海肽生物科技有限公司的4TC2-20C6cc，所述cTnI抗体2#为购自广东菲鹏生物有限公司的cTnI-McAb-30，所述cTnI抗体3#为购自广东菲鹏生物有限公司的cTnI-McAb-29；用含0.008mgmLRBC抗体、0.2mgmL鼠IgG、0.5%酪蛋白钠盐、1%S9、0.2%EDTA-Na2、0.5%PEG20000、3%蔗糖的10mM、pH7.4的PBS的样品垫处理液处理玻璃纤维膜得到样品垫；在第一结合垫上用含0.5%酪蛋白钠盐、1%Tween20、20%海藻糖的50mM、pH7.5的Tris-Hcl缓冲液的稀释液进行处理，所述稀释液中含有2%生物素标记的cTnI抗体1#、cTnI抗体2#混合物，均匀喷涂两条线，用量为2μLcm；在第二结合垫上用含0.5%甘氨酸、0.5%酪蛋白钠盐、2%Tween20、20%海藻糖的50mM、pH7.5的Tris-Hcl缓冲液的标记稀释液进行处理，所述标记稀释液中含有2%AIE荧光微球标记的cTnI抗体3#和0.5%AIE荧光微球标记的DNP-BSA，均匀喷涂两条线，用量为2μLcm；分别用10mM、pH7.4的PBS缓冲液将链霉亲和素和DNP-Ab浓度分别稀释2mgmL、0.5mgmL，用量为1μLcm，分别作为检测线和质控线平行划于硝酸纤维素膜上进行包被；所述AIE荧光微球的粒径为100nm～300nm。

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