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申请/专利权人：科尼格沃斯(无锡)医学科技有限公司;上海领检科技有限公司
摘要：本发明涉及免疫诊断领域，特别是涉及一种纳米金微球复合物及其制备方法和用途。本发明提供的纳米金微球复合物为表面直接或间接附着有亲和素、生物素、多肽和寡核苷酸的纳米金。本发明提供的纳米金微球复合物上的DNA数量更高，通过纳米金微球复合物进行免疫反应，再通过荧光定量PCR法扩增DNA并检测荧光信号来间接检测待测蛋白的含量，因此可实现更高灵敏度的免疫PCR检测方法；本发明可使样品的检测灵敏度达到飞克级别fgml，为临床诊断提供更好的技术支持；可以为其他试剂盒的开发提供一种高灵敏度、高特异性的检测方法。
主权项：1.一种纳米金微球复合物，其特征在于，所述纳米金微球复合物为表面直接或间接附着有亲和素、生物素、多肽和寡核苷酸的纳米金；所述多肽和所述亲和素附着于所述纳米金表面，所述亲和素连接所述生物素，所述生物素连接所述寡核苷酸，所述亲和素为链霉亲和素；所述纳米金的粒径为15-20nm；所述寡核苷酸的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；所述纳米金微球复合物的制备方法包含如下步骤：1将交联剂和纳米金混合，活化纳米金；2将亲和素和步骤1中活化后的纳米金混合，获得负载亲和素的纳米金；3将多肽和步骤2中清洗后负载亲和素的纳米金混合，获得负载亲和素和多肽的纳米金；4将连有连有多核苷酸的生物素和步骤3中负载亲和素和多肽的纳米金混合，与封闭液混合封闭，获得所述纳米金微球复合物；所述制备方法包含如下特征：a步骤1中所述交联剂选自EDC或DMTMM；b以步骤1中反应液的总体积为基准，所述交联剂的浓度为9-11mgml；c以步骤1中反应液的总体积为基准，所述纳米金的浓度为45-55μgml；d以步骤2中反应液的总体积为基准，所述亲和素的浓度为30-40μgml；e以步骤3中反应液的总体积为基准，所述多肽的浓度为65-75μgml；f以步骤4中反应液的总体积为基准，所述连有多核苷酸的生物素的浓度为0.001-0.01pmolml。
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