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对非人动物进行基因改造和构建免疫缺陷动物模型的方法 

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申请/专利权人:未来模式(苏州)生物科技有限公司

摘要:本申请公开了一种对非人动物进行基因改造的方法,包括:对非人动物细胞受精卵进行基因改造,包括利用Piggy转座酶依赖的转基因系统对非人动物受精卵进行基因编辑。进一步包括:在非人动物中过表达目标蛋白一和或目标蛋白二;目标蛋白一为主要在T细胞、B细胞和NK细胞中表达的目标蛋白,目标蛋白一基因原位人源化后,在重度免疫缺陷非人动物中检测不到目标蛋白一的基因表达;目标蛋白二为可能会影响免疫缺陷非人动物健康的目标蛋白。还公开了一种构建重度免疫缺陷的动物模型的方法;以及一种PiggyBac转座子系统质粒。利用本申请的方法获得的小鼠更加省时高效,且健康状况更好,具有更长的试验窗口期,利用所述小鼠重建的人免疫系统功能也更加完备。

主权项:1.一种对非人动物进行基因改造的方法,其包括:对非人动物细胞的受精卵进行基因改造使得利用特异性在髓系细胞表达的启动子来在非人动物中过表达目标蛋白,所述目标蛋白为目标蛋白一和目标蛋白二;基因改造包括利用Piggy转座酶依赖的转基因系统对非人动物的受精卵进行基因编辑;其中,所述受精卵是通过体外受精得到的,并且在体外培养一定时间的受精卵,所述一定时间为6小时以上;所述非人动物是以NOD为遗传背景的小鼠;对非人动物细胞的受精卵进行基因改造是通过对受精卵的细胞质进行注射来完成的;其中,所述目标蛋白一主要在T细胞、B细胞和NK细胞中表达;所述目标蛋白一的基因原位人源化后,在重度免疫缺陷非人动物中检测不到所述目标蛋白一的基因的表达;所述目标蛋白一为人白细胞介素-3人IL3;所述目标蛋白二可能会影响免疫缺陷非人动物的健康;所述目标蛋白二为人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子人GM-CSF;所述髓系细胞表达的启动子选自人CD68启动子、CSF1R启动子、CD11c启动子、CD11b启动子、MSR-A启动子、lysozyme启动子和MHCclassII启动子MHC-II。

全文数据:

权利要求:

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