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申请/专利权人：天津科技大学
摘要：本发明公开了一种重组抗菌肽PMAP‑37及其制备方法和应用，所述的抗菌肽PMAP‑37是根据数据库筛选出的抗菌肽基因，并进行毕赤酵母密码子优化后插入pPICZαA中，最后经甲醇诱导表达而得。所得重组抗菌肽活性较好，并且具受温度、pH及酶的影响较小，稳定性较好，能广谱抑菌，在食品保鲜、植物防病害等方面有较好的应用前景。
主权项：1.一种重组抗菌肽PMAP-37在制备红李抗菌剂中的应用，其特征在于：所述重组抗菌肽PMAP-37的制备方法，包括，表达载体重组：将SEQIDNO:2所示PMAP-37目的基因进行合成，并连接于pPICZα-A载体上构成重组质粒pPICZα-PMAP-37-A；重组菌株构建：用SacI内切酶线性化重组后的质粒pPICZα-PMAP-37-A，并将处理后的质粒转入毕赤酵母GS115中，获得带有目的基因的重组菌株；表达抗菌肽：筛选出pPICZα-PMAP-37-A的阳性转化子进行诱导表达，收取发酵后的上清液，获得抗菌肽；其中，所述PMAP-37目的基因片段是将PMAP-37抗菌肽原始序列根据酵母表达系统偏好性进行密码子优化，在N端依次加入EcoRI、起始密码子ATG、6个组氨酸标签以及GATGATGATGATAAG15个碱基，C端依次加入终止密码子TAA及XbaI获得；所述重组抗菌肽氨基酸序列如SEQIDNO:1所示；所述重组抗菌肽PMAP-37对金黄色葡萄球菌、大肠埃希、大肠O157、沙门氏菌和单增李斯特菌最小抑菌浓度为0.24μgmL，对枯草芽孢杆菌最小抑菌浓度为0.12μgmL。
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百度查询： 天津科技大学 一种重组抗菌肽PMAP-37及其制备方法和应用
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