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申请/专利权人：北京市农林科学院
申请日：2024-07-27
公开（公告）日：2024-10-11
公开（公告）号：CN118755869A
专利技术分类：....· · · 用于植物、真菌或藻类[2018.01]
专利摘要：本发明公开了一种基于RPA‑CRISPRCas12a的可视化检测葡萄溃疡病菌的方法，属于植物真菌病原物分子检测技术领域。本发明通过选择Tub基因作为靶向基因，设计了一组RPA特异性引物和特异性CrRNA，并对反应体系进行了优化，将RPA扩增方法与CRISPRCas12a的检测方法相结合来检测葡萄溃疡病菌，通过侧流层析试纸条实现检测结果可视化。本发明的检测方法具有较好的特异性和灵敏度，操作简单快速，只需要简单的恒温仪器就可进行扩增反应，可在田间或基层工作现场对葡萄溃疡病菌进行检测。
专利权项：1.一种基于RPA-CRISPRCas12a的可视化检测葡萄溃疡病菌的组合物，其特征在于，包括RPA引物、CrRNA和ssDNA探针；其中，RPA引物序列：正向引物为序列表中序列1所示的核苷酸片段，反向引物序列为序列表中序列2所示的核苷酸片段；CrRNA为基于PAM位点设计的能引导Cas12a靶向识别RPA产物的特异性向导RNA；所述CrRNA为序列表中序列3所示的核苷酸片段；ssDNA探针为两端分别修饰有FAM和Biotin基团的单链DNA，ssDNA探针的序列如序列表中序列4所示。
百度查询： 北京市农林科学院 一种基于RPA-CRISPR/Cas12a的可视化检测葡萄溃疡病菌的试剂盒
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