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申请/专利权人:武汉光谷中源药业有限公司
摘要:本发明公开了一种间充质干细胞治疗肺纤维化的体外药效分析方法。所述方法是通过TGF‑β诱导肺部支气管上皮细胞BEAS‑2B发生上皮间质转化,体外构建得到肺纤维化细胞模型,然后在此基础上给予间充质干细胞进行干预治疗,最后分别从mRNA水平、细胞表面表达蛋白水平和因子分泌水平三方面探究间充质干细胞抑制BEAS‑2B细胞间质情况,实现间充质干细胞治疗肺纤维化的体外药效分析。本发明提供的间充质干细胞治疗肺纤维化的体外药效分析方法可稳定指示间充质干细胞治疗肺纤维化的效果,在间充质干细胞治疗肺纤维化的体外药效分析中具有良好的应用前景。
主权项:1.一种间充质干细胞治疗纤维化的体外药效分析方法,所述方法包括如下步骤:1将含有间充质干细胞培养体系的嵌套培养小室插入含有纤维化细胞培养体系的细胞培养板中,使所述纤维化细胞与所述间充质干细胞进行非接触式共培养,得到共培养后的纤维化细胞;所述间充质干细胞培养体系和所述纤维化细胞培养体系中的培养基均为支气管上皮细胞生长基础培养基;2从蛋白水平和或mRNA水平和或因子分泌水平检测所述共培养后的纤维化细胞,评价所述间充质干细胞对纤维化的治疗效果;所述蛋白水平包括上皮细胞钙粘素CD324的蛋白表达水平;所述mRNA水平包括纤连蛋白Fibronectin的mRNA表达水平和EMT转录因子Snail的mRNA表达水平;所述因子分泌水平包括基质金属蛋白酶1的分泌水平和基质金属蛋白酶抑制因子1的分泌水平。
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