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申请/专利权人：湖南大学

摘要：本发明提供了一种人工毛囊及其体外构建方法和应用，所述人工毛囊是由真皮乳头细胞与毛囊干细胞混合后通过体外培养得到。所述体外构建方法是将真皮乳头细胞DPCs与毛囊干细胞HFSCs按照0.1:1至10:1的数量比例进行混合，重悬在Matrigel中，加入类器官诱导培养基OIM1或OIM2中培养7‑9天。本发明可以在体外构建尺寸可控、具有完整结构和功能的人工毛囊器官，主要应用于体外毛囊相关药物的开发或者体内毛囊移植，后者可作为在体内再生毛发的细胞（器官）制剂。

主权项：1.一种人工毛囊的体外构建方法，包括以下步骤：1分别得到真皮乳头细胞和毛囊干细胞，选取P10代以内的细胞，所述真皮乳头细胞与毛囊干细胞来源于动物的真皮细胞或表皮细胞；所述动物为小鼠；2对分离后的单细胞悬液用流式抗体进行标记，流式分选DPCs与HFSCs；3将DPCs与HFSCs按比例进行混合，重悬在Matrigel中，加入类器官诱导培养基培养7-9天；所述混合是真皮乳头细胞与毛囊干细胞按照0.1:1至10:1的数量比例进行混合；所述培养环境为普通48孔板；所述类器官诱导培养基的成分和终浓度为：R-Spondin1100-200ngmL；Wnt-3a10-100ngmL；Noggin5-50ngmL；A83-015-100nM；SB2021901-5µM；Y-276321-50µM；EGF1-500ngmL；bFGF0.1-100ngmL；Hydrocortisone0.5-1µgmL；Nicotinamide2-10mM；B27supplement0.5%-5%；N20.5%-5%；GlutaMax100x0.5%-5%；Hepes1-10mM；PenicillinStreptomycin0.8%-1.2%；Primocin10-100µgmL；或者所述培养基的成分和终浓度为：R-Spondin10.1-1µgmL；Wnt-3a10-100ngmL；BMP41-25ngmL；Y-276321-50µM；EGF1-500ngmL；bFGF0.1-100ngmL；Hydrocortisone0.3-0.5µgmL；Nicotinamide8-12mM；B27supplement0.5%-5%；N20.5%-5%；GlutaMax0.5%-5%；Hepes1-10mM；PenicillinStreptomycin0.8%-1.2%；Primocin10-100µgmL；其中溶剂为AdvancedDMEMF12；百分含量表示体积百分比。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 湖南大学 一种人工毛囊及其体外构建方法和应用