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申请/专利权人：山东省林业科学研究院

摘要：本发明公开了一种用于黑杨切枝水培杂交育种的方法,属于林木杂交育种技术领域。针对杨树切枝水培中常见的落果、蒴果发育欠佳、数量少等问题，为提高杂交种子结实率和质量，从亲本确定、花枝选择与处理、添加营养液、精准把握花粉采收和授粉时期、控制温湿度等方面入手，提高花枝的营养供给、降低微生物污染，突破常规室内切枝杂交种子结实率低、质量欠佳的技术瓶颈。本发明可简化操作流程，降低育种成本，进一步提升杂交育种质量。

主权项：1.一种用于黑杨切枝水培杂交育种的方法，包括以下步骤：S1.亲本选择和花枝采集时间：杨树为单性花，雌雄异株，根据育种目标，选择树龄在6年以上的具有优良性状的雌株和雄株作为母本和父本；S2.切取杨树花枝：在杨树母本和父本植株树冠的中上部，剪取枝龄2-3年、直径≥2cm、生长粗壮、发育良好无病虫害的花枝，长度约80-120cm；花枝采收后，用塑料膜包裹严密，放入气调库中4℃冷藏保存；S3.雄花枝水培处理：光照充足，温度在18℃-25℃的房间，去除无花芽的徒长枝和距基部50cm以下的花芽，50cm以上的健壮花芽全部保留；花枝基部剪斜口，切面平整，以便于水培过程中的养分吸收；将切好的雄花枝放入装有清水的水桶中，水深到水桶13-12处，确保花枝基部浸泡在水中；花枝交叉放入，防止花枝因浮力浮出水面；S4.花粉的采集：当雄花开放，花药自然破裂时，将花序套入硫酸纸袋中，轻弾花序，让花粉散落于袋内，收集的花粉倒入160目花粉筛中，筛除杂物；用干净的白纸或硫酸纸将收集的花粉包起，放入装有硅胶的自封袋中，4℃冰箱中低温保存；S5.雌花枝的水培管理：光照充足，温度在18℃-25℃的房间，雌花枝每枝留3-5个花芽和顶芽，去掉其余的叶芽和花芽，以免过多消耗枝条养分，影响种子发育；花枝基部剪斜口，切面平整，放入水桶中，深度到水桶13-12处，确保花枝基部浸泡在水中；花枝交叉放入，防止花枝因浮力浮出水面；S6.授粉：当雌花柱头晶莹透亮、分泌黏液时开始授粉；用消毒的毛笔蘸取少量花粉，轻轻地撒在雌花柱头上，连续授粉2～3d；S7.授粉后的管理：保持光照充足，室内温度控制在22～25℃；室内湿度最初不低于65％，后期可降低室内湿度但不能低于50％，待叶芽展叶后去掉生长点，留1-2个叶片，维持其蒸腾拉力又不过多消耗养分；S8.杂交种实的采收：当蒴果开始由绿变黄时，套上高密度尼龙网袋，防止蒴果开裂后种子飞散；待12的蒴果开裂时,摘下网袋，取出种子，脱粒后按杂交组合分别放置。

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