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申请/专利权人：上海交通大学医学院附属瑞金医院;裕菁科技(上海)有限公司

摘要：本发明公开了一种相同色谱系统下13个代谢调控核心分子的测定方法及其检测判别模型的构建；13个代谢调控核心分子为甲硫氨酸、同型半胱氨酸、半胱氨酸、维生素B2、5‑甲基四氢叶酸、叶酸、磷酸吡哆醛、4‑吡哆酸、甲基丙二酸、甜菜碱、胆碱、S‑腺苷甲硫氨酸、S‑腺苷同型半胱氨酸。本发明检测体系中采用低浓度乙酸作为流动相添加剂，使得极性很高的胆碱可很好保留在色谱柱上，响应也大大增加，并且通过WCX富集使得S‑腺苷甲硫氨酸基质影响大大减少，可准确测定血清中痕量S‑腺苷甲硫氨酸，进一步结合特定色谱柱选择等，实现了13个化合物在相同色谱系统下准确测定，同时建立了判别模型，实现临床对该13个化合物的测定结果的快速解读。

主权项：1.一种相同色谱系统下测定13个代谢调控核心分子的方法，其特征在于，所述13个代谢调控核心分子为甲硫氨酸、同型半胱氨酸、半胱氨酸、维生素B2、5-甲基四氢叶酸、叶酸、磷酸吡哆醛、4-吡哆酸、甲基丙二酸、甜菜碱、胆碱、S-腺苷甲硫氨酸、S-腺苷同型半胱氨酸；所述方法包括如下步骤：S1、取血浆或血清样品，分为A、B、C三份样品；S2、A样品中加入还原剂和内标溶液，甲醇沉淀后离心取上清C；所述内标分别为半胱氨酸、甲硫氨酸、甜菜碱、胆碱、同型半胱氨酸、5-甲基四氢叶酸、甲基丙二酸、S-腺苷同型半胱氨酸、维生素B2、4-吡哆酸、叶酸的内标物；S3、B样品中加入内标溶液，5-20％TCA沉淀后离心取上清B；所述内标为磷酸吡哆醛的内标物；S4、C样品中加入内标溶液，乙酸铵调节pH值后离心取上清，再用WCX富集纯化、淋洗得上清C；所述内标为S-腺苷甲硫氨酸的内标物；S5、上清A、上清B、上清C分别注入液相色谱质谱联用仪进行分析，色谱检测采用的流动相中添加低浓度乙酸；色谱检测是在不更换色谱系统的情况下进行分析，采用的是150mm*4.6mm规格的C18的色谱柱；S6、基于同位素稀释法计算样品中13个代谢调控核心分子的含量。

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