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申请/专利权人:赣南创新与转化医学研究院
摘要:本发明属于生物工程技术领域,具体地涉及一种改良的CHO‑S细胞瞬时转染方法,该转染方法包括以下步骤:在瞬时转染的前3天将CHO‑S细胞传代培养,调整细胞密度至0.35×106cellsmL并放入摇床中进行培养;瞬时转染当天,将CHO‑S细胞密度调整为4×106‑6×106cellsmL,得到CHO‑S细胞悬液;转染前,将配置好的A液与B液,混匀后静置得到混合滴液;将混合滴液加入到CHO‑S细胞悬液中进行培养,得到重组CHO‑S细胞。本发明的转染方法不仅转染效率高,同时可以获得更高CHO‑S细胞目的抗体表达量,为蛋白质生物治疗剂的开发提供新思路。
主权项:1.一种改良的CHO-S细胞瞬时转染方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)在瞬时转染的前3天将CHO-S细胞传代培养,调整细胞密度至0.35×106cellsmL,将含有一定体积细胞的摇瓶放入摇床中进行培养;(2)瞬时转染当天,对CHO-S细胞计数,并用新配制的转染培养基稀释调整细胞密度为4×106-6×106cellsmL,检测细胞活率在97%以上,得到CHO-S细胞悬液;(3)转染前,将配置好的A液与B液,混匀后静置一段时间,得到混合滴液;(4)将步骤(3)所述混合滴液加入到CHO-S细胞悬液中,按照细胞培养条件进行培养,得到重组CHO-S细胞。
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权利要求:
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