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申请/专利权人:贝克顿迪金森公司
摘要:本申请涉及确定5’转录物序列。本文的公开内容包括用于对样品中的核酸靶进行标记的系统、方法、组合物和试剂盒。在一些实施方案中,核酸靶例如,mRNA最初在3’末端进行条形码化barcoded,并且随后在模板转换反应和分子间和或分子内杂交和延伸之后在5’末端进行条形码化。在一些实施方案中,提供了基于5’‑和基于3’‑的基因表达谱分析的方法。在一些实施方案中,还提供了免疫组库谱分析immunerepertoireprofiling方法。
主权项:1.一种用于对样品中的核酸靶进行标记的方法,所述方法包括:使核酸靶的拷贝与多于一个寡核苷酸条形码接触,其中每个寡核苷酸条形码包含分子标记和能够与所述核酸靶杂交的靶结合区;在逆转录酶和包含所述靶结合区或其一部分的模板转换寡核苷酸的存在下,使与所述核酸靶的拷贝杂交的所述多于一个寡核苷酸条形码延伸,以产生多于一个条形码化核酸分子,每个所述条形码化核酸分子包含与所述核酸靶的至少一部分互补的序列、第一分子标记、所述靶结合区和所述靶结合区的互补体;使每个条形码化核酸分子的所述靶结合区的互补体与以下的靶结合区杂交:i所述多于一个寡核苷酸条形码中的寡核苷酸条形码,ii所述条形码化核酸分子本身,和或iii所述多于一个条形码化核酸分子中的不同条形码化核酸分子;以及使所述多于一个条形码化核酸分子的3’-末端延伸,以产生多于一个延伸的条形码化核酸分子,每个所述延伸的条形码化核酸分子包含所述第一分子标记和第二分子标记。
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