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申请/专利权人:杭州嘉因生物科技有限公司
摘要:本公开提供了一种重组质粒及其制备方法,其中重组质粒系统包含1)表达质粒,所述表达质粒包括复制起始位点、目的基因或插入目的基因的克隆位点、筛选标签基因、重组位点和识别序列;2)切割质粒,所述切割质粒包括sgRNA序列、编码Cas蛋白的核酸序列、重组酶的编码基因和温敏性Ori;其中所述重组位点为成对的同向MRS重组位点,在重组酶存在下能够使所述表达质粒发生自身重组,所述切割质粒在诱导后对未重组的质粒和重组后的含骨架的环状双链DNA进行识别和切割。
主权项:1.一种重组质粒系统,其包含1)表达质粒,所述表达质粒包括复制起始位点、目的基因或插入目的基因的克隆位点、筛选标签基因、重组位点和一个或多个sgRNA的识别序列;2)切割质粒,所述切割质粒包括sgRNA序列、编码Cas蛋白的核酸序列、重组酶的编码基因和温敏性Ori;其中所述重组位点为成对的重组位点,所述成对的重组位点与所述复制起始位点和所述目的基因或所述克隆位点紧邻,所述一个或多个sgRNA的识别序列不位于所述成对的重组位点、复制起始位点和所述目的基因或所述克隆位点之间,在重组酶存在下能够使所述表达质粒发生自身重组而形成无筛选标签基因的纳米质粒和含骨架的环状双链DNA,所述切割质粒在诱导后对未重组的质粒和重组后的含骨架的环状双链DNA进行识别和切割。
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权利要求:
百度查询: 杭州嘉因生物科技有限公司 一种重组质粒及其制备方法
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