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申请/专利权人:广西民族师范学院
摘要:本发明属于电化学传感器技术领域,提供基于Au@MnO纳米酶信号放大的电化学适配体传感器、其制备方法及应用。其制备方法包括以下步骤:制备纳米金AuNPs;制备Au@MnO纳米酶;制备信号探针BSAENR2Au@MnO;制备电化学适配体传感器,首先在玻碳电极表面沉积银纳米颗粒,接着在AgNO3GCE表面自组装恩诺沙星适配体ENR1,得到ENR1AgNO3GCE,依次孵育得到BSAENR2Au@MnOENRBSAENR1AgNO3GCE电极。本发明的传感器具有较低的检出限、较宽的线性范围、较高的灵敏度和良好的选择性,且稳定性和重现性良好,实现了定量检测恩诺沙星的目的。
主权项:1.基于Au@MnO纳米酶信号放大的电化学适配体传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1制备纳米金AuNPs;2制备Au@MnO纳米酶:按摩尔比为1:1~1.2称取可溶性二价锰盐和2,5-二羟基对苯二甲酸,溶解于DMF、乙醇和水的混合溶液中,加入AuNPs分散液,磁力搅拌16h以上,将混合溶液转移到高压反应釜中,在130~140℃下反应16h以上,反应结束等待反应釜自然冷却后离心收集沉淀,沉淀物用甲醇洗涤多次,结束后烘干,最后在N2氛围中升温到580~620℃下热解1.5~2.5h,得Au@MnO纳米酶;3制备信号探针:将恩诺沙星适配体ENR2修饰液与Au@MnO纳米酶分散液混合并于低温下孵育;ENR2通过Au-N键被锚定在Au@MnO的表面,离心得到ENR2Au@MnO并重新分散在BSA溶液中反应,以封闭非特异性点位;最后,通过离心得到BSAENR2Au@MnO并重新分散在PBS缓冲液中,保存备用;4制备电化学适配体传感器:首先在玻碳电极表面沉积银纳米颗粒;接着在AgNO3GCE表面自组装恩诺沙星适配体ENR1,得到ENR1AgNO3GCE;随后,将用BSA溶液滴在ENR1AgNO3GCE上反应以封闭非特异性位点,用PBS缓冲液清洗电极;继而,滴加不同浓度的恩诺沙星ENR标准修饰液到BSAENR1AgNO3GCE上孵育1h得到ENRBSAENR1AgNO3GCE,用PBS缓冲液清洗电极;最后,滴加信号探针BSAENR2Au@MnO分散液在ENRBSAENR1AgNO3GCE上反应1h,用PBS缓冲液清洗电极,得到BSAENR2Au@MnOENRBSAENR1AgNO3GCE电极,即为所述基于Au@MnO纳米酶信号放大的电化学适配体传感器;所述恩诺沙星适配体ENR1的序列为:5’-CCCATCAGGGGGCTAGGCTAACACGGTTCGGC-3’,恩诺沙星适配体ENR2的序列为:5’-ATCTCTGAGCCCGGGTTATTTCAGGGGGA-3’。
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