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申请/专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院;北京生命科技研究院有限公司

摘要：本发明公开了一种原位实时监测烟碱气溶胶暴露自由活动动物脑内神经递质水平的方法，所述方法基于一种小动物自由活动气溶胶暴露装置和FSCV；包括如下步骤：I.动物脑内感兴趣脑区植入FSCV工作电极和参比电极；II.基于所述小动物自由活动气溶胶暴露装置，采集气溶胶暴露前后神经递质信号；III.电极体外校准；IV.数据处理和分析。本发明能够以更接近于人类吸食烟草制品的方式使清醒自由活动动物通过口鼻吸入方式暴露于烟碱气溶胶中，同时利用具有高时空分辨率的FSCV系统，实现实时监测烟碱引起的脑内神经递质的变化。

主权项：1.一种原位实时监测烟碱气溶胶暴露自由活动动物脑内神经递质水平的方法，所述方法基于一种小动物自由活动气溶胶暴露装置和FSCV；其中，所述小动物自由活动气溶胶暴露装置包括活动室、气溶胶发生模块、气溶胶检测模块和净化模块，所述活动室分别与所述气溶胶发生模块、气溶胶检测模块和净化模块相连通；所述活动室在顶部设置通孔，仅供电极导线通过，所述电极导线一端连接数据采集分析系统，一端连接植入动物脑内的FSCV工作电极和参比电极；所述方法包括如下步骤：I.动物脑内感兴趣脑区植入FSCV工作电极和参比电极；II.神经递质信号采集将步骤I得到的脑内植入了电极的动物放入所述活动室，通过电极导线将所述FSCV工作电极、参比电极与所述数据采集分析系统连通，同时开始信号采集，待动物适应环境后且基线信号稳定后，启动气溶胶发生模块、气溶胶检测模块、气溶胶采样模块，使烟碱气溶胶进入所述活动室，实时检测活动室内的烟碱气溶胶的浓度，记录电流随时间的变化；III.电极体外校准将所述参比电极和FSCV工作电极从动物脑内取出，保持与所述数据采集和分析系统的连通，置于pH＝7.0PBS缓冲液中，运行20min左右使电极稳定，然后分次在PBS缓冲液中加入与所述FSCV工作电极相应的神经递质，记录电流信号值；根据神经递质浓度和电流信号值绘制标准曲线；IV.数据处理和分析根据步骤III得到的神经递质浓度和电流信号标准曲线，计算步骤II测定得到的电流强度对应的脑内相应神经递质的浓度，绘制循环伏安曲线和烟碱气溶胶暴露后脑内神经递质随时间的变化曲线。

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