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申请/专利权人：复旦大学
摘要：本发明提供了一种一管式多重RPARAA‑CRISPRCas12a可视化检测HIV‑1DNA、RNA的引物组、试剂盒及其应用。本发明建立了针对HIV‑1DNA、RNA的多重RPARAA与CRISPRCas12a联合快速检测方法，该方法能够特异性检测到10copiesμL的HIV‑1DNA、RNA，且与其他常见病毒无交叉反应。本方法结合侧向流层析试纸条和蓝光灯或紫外灯在30分内即可肉眼观察并进行定性判断。本发明的多重RPARAA核酸扩增产物被crRNA识别后激活Cas12a对ssDNA核酸小分子酶切释放荧光信号被检测，在一管内实现逆转录、扩增、酶切反应，具有防污染的优势。本发明所述的多重RPARAA‑CRISPRCas12a可视化检测HIV‑1DNA、RNA的方法兼容了国内所有HIV‑1流行毒株亚型，同时具备特异性强、灵敏度高、操作简单快速、可肉眼观察结果、无设备需求的优势，可供偏远基层、学校、机场等地方使用。
主权项：1.一管式多重RPARAA-CRISPRCas12a可视化检测HIV-1DNA、RNA的引物组，其特征在于，该引物组包括多重RPARAA扩增引物组和CRISPRCas12a酶切检测体系所需核苷酸序列，所述多重RPARAA扩增引物组包括上游引物和下游引物，所述CRISPRCas12a酶切检测体系所需核苷酸序列包括crRNA和ssDNA，ssDNA的核苷酸序列为5’-TTTATTT-3’，当所述上游引物选自上游引物F1，下游引物选自下游引物R1时，crRNA选择3-crRNA-3；当所述上游引物选自上游引物F2，下游引物选自下游引物R2时，crRNA选择7-crRNA-6；上游引物F1的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，下游引物R1核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，上游引物F2核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，下游引物R2核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；3-crRNA-3的特异性核苷酸序列如SEQIDNO.5所示，7-crRNA-6的特异性核苷酸序列如SEQIDNO.6所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 复旦大学 一管式多重RPA/RAA-CRISPR/Cas12a可视化检测HIV-1DNA、RNA的引物组、试剂盒及其应用
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