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申请/专利权人：广州领鲜生物科技有限公司

摘要：本发明公开了一种茶多酚的提取方法，属于茶多酚的提取领域。本发明提供一种低温超声技术联合脉冲电场技术的提取方法，绿茶粉碎物于低温下放置在超声技术和脉冲电场技术联用的提取装置中，通过放电和超声的双重技术，使得茶多酚的提取率高达32％以上。采用蛋白质沉淀法，有效去除了茶多酚中的草酸和咖啡因，提高了茶多酚的纯度，草酸的含量小于0.05mgg，咖啡碱含量小于0.04mgg。同时利用了线团交联结构的活性物质，与蛋白质溶液在正负电荷作用下蛋白质‑茶多酚微粒被层层包裹成茶多酚固体微球的方法，使得提取出来的茶多酚可以长时间保持活性，适合用在动物饲料添加剂中。

主权项：1.一种茶多酚的提取方法，其特征在于：所述茶多酚的提取方法，包括以下步骤：S001,将绿茶清洗干净，进行冷冻干燥后做粉碎处理，得到绿茶粉碎物；在超声波提取器内置电容耦合夹，与静电放电发生器连接，形成超声技术和脉冲电场技术联用的提取装置；S002,向绿茶粉碎物中加入重量为绿茶粉碎物0.5～1倍的去离子水，在温度50～60℃下，置于提取装置中进行提取，搅拌均匀，提取20～30分钟，用滤布过滤后得到第一级提取液和第一级滤渣待用；S003,为了提取更充分，对第一级滤渣进行再次提取，向第一级滤渣加入重量为第一级滤渣0.5～1倍的去离子水，在温度50～60℃下，置于提取装置中进行二次提取，搅拌均匀，提取20～30分钟，用滤布过滤得到第二级提取液和第二级滤渣；S004,将第二级提取液和第一级提取液混合得到第三提取液，在温度10～20℃下，充分搅拌；在真空度-0.09Mpa下，低温真空浓缩至绿茶粉碎物重量的0.2～0.5倍，得到茶多酚提取液，2～5℃低温保存；将茶多酚提取液除去草酸和咖啡因，并制备得到干燥的线团交联结构的活性物质和蛋白质双重包裹的茶多酚固体微球，具体为：S101，将明胶和牛血清白蛋白加入去离子水中在50～60℃下加热搅拌30～50分钟至完全溶解，得到蛋白质溶液；加入柠檬酸，调节pH为5.5～6.5，使蛋白质溶液中的蛋白质带负电荷；所述的蛋白质溶液的质量分数为8～12%，蛋白质溶液的等电点为4.7；所述的牛血清白蛋白与明胶的质量比为1:6～8；S102，将带负电的蛋白质溶液加入到茶多酚提取液中，缓慢搅拌，出现絮状凝胶状物质，继续缓慢搅拌，反应50～80min，加入聚乙二醇800，快速搅拌10～20min使得絮状凝胶状物质分散在混合液中，形成均匀的混悬液；将混悬液进行真空抽滤，所得沉淀离心洗涤，得到蛋白质-茶多酚微粒；S103,在温度50～60℃下，用0.01％乙酸水溶液将壳聚糖配制成浓度为8～12%的壳聚糖溶液；调节pH为5.5，搅拌1个小时，壳聚糖双螺旋分子链结构水解为单链线团结构，加入赖氨酸和谷氨酰胺，继续搅拌，单链线团结构进一步转变为相互缠绕的线团结构，反应150～200分钟，形成壳聚糖交联谷氨酰胺和赖氨酸的相互缠绕的线团结构，该结构上富集大量正电荷，记为带正电荷的线团交联结构的活性物质，得到含有带正电荷的线团交联结构的活性物质的液体；其中，谷氨酰胺、赖氨酸和壳聚糖的质量比为1～2：2～3:10～15；S104,再将蛋白质-茶多酚微粒加入到含有带正电荷的线团交联结构的活性物质的液体中，调节pH为7.0左右，缓慢搅拌使蛋白质-茶多酚微粒分散均匀后停止搅拌，静止反应20～30min；再缓慢搅拌10～20min，再静止反应20～30min后，得到均匀分散的微球混合液，其中微球为带正电荷的线团交联结构的活性物质与带负电的蛋白质-茶多酚微粒形成的包覆性微球，将微球混合液进行过滤，所得沉淀离心洗涤,将离心所得样品进行冷冻干燥，制得线团交联结构的活性物质和蛋白质双重包裹的茶多酚固体微球。

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