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申请/专利权人：张艾涵
摘要：本发明公开了一种基于基因工程改造的贻贝粘蛋白的制备方法，包括：S1、选取贻贝粘蛋白基因，根据贻贝粘蛋白和多巴基团修饰酶的基因序列，进行人工合成或PCR扩增，S2、将步骤S1中获得的贻贝粘蛋白放入发酵罐中，在优化培养条件下，对贻贝粘蛋白进行细菌发酵处理，S3、根据改进型贻贝粘蛋白的菌体特性，分离并破碎细胞，再结合亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析，对多巴基团进行活化和偶联反应，提取改进型贻贝粘蛋白中具有细菌表达的贻贝粘蛋白，S4、在低温、真空的条件下，对步骤S3中提取的贻贝粘蛋白进行浓缩和冻干处理得到粉末状的贻贝粘蛋白。从而增强粘附效果，增强了贻贝粘蛋白的粘附能力，使其在各种表面上的附着更加牢固和持久。
主权项：1.一种基于基因工程改造的贻贝粘蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、选取贻贝粘蛋白基因，根据贻贝粘蛋白和多巴基团修饰酶的基因序列，进行人工合成或PCR扩增，将贻贝粘蛋白和多巴基团修饰酶分别克隆至表达载体中，构建重组质粒，再将重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞中，通过抗生素筛选获得阳性克隆，并进行质粒验证和测序确认，获得能够表达多巴基团修饰的贻贝粘蛋白；S2、将步骤S1中获得的贻贝粘蛋白放入发酵罐中，在优化培养条件下，对贻贝粘蛋白进行细菌发酵处理，并在发酵过程中，通过单因素实验或正交实验，优化贻贝粘蛋白中的营养成分比例，培养出基因工程细菌，获得改进型贻贝粘蛋白；S3、根据改进型贻贝粘蛋白的菌体特性，选用离心或超滤的方式，分离并破碎细胞，再结合亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析，并引入N-羟基琥珀酰亚胺酯和1-乙基-3-3-二甲氨丙基碳二亚胺化学修饰剂，对多巴基团进行活化和偶联反应，提取出改进型贻贝粘蛋白中具有细菌表达的贻贝粘蛋白；S4、在低温、真空的条件下，对步骤S3中提取的贻贝粘蛋白进行浓缩和冻干处理，经打磨粉碎后，得到粉末状的贻贝粘蛋白。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 张艾涵 一种基于基因工程改造的贻贝粘蛋白的制备方法
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