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申请/专利权人:苏州华益美生物科技有限公司
摘要:本发明公开人PIK3CA基因突变检测试剂盒,其特征在于,其包含:内参检测试剂,其包含内标特异性引物、内标特异性探针及dNTP溶液;PIK3CA突变检测试剂,其包含PIK3CA基因突变型特异性引物、突变型特异性引物探针及Mg2+水溶液;TaqDNA聚合酶、PIK3CA阴性质控品和阳性质控品,其分别包含野生型和突变型以及内标基因的片段。通过TaqMan探针对扩增产物进行检测,使得突变基因得到扩增而野生型基本不扩增,从而达到高检测特异性和高灵敏度。
主权项:1.一种人PIK3CA基因突变检测试剂盒,其特征在于,其包含:1内参检测试剂,其包含内标特异性引物、内标特异性探针及dNTP溶液;2PIK3CA突变检测试剂,其包含PIK3CA基因突变型特异性引物、突变型特异性引物探针及Mg2+水溶液;3TaqDNA聚合酶、PIK3CA阴性质控品和阳性质控品,其分别包含野生型和突变型以及内标基因的片段;其中,所述PIK3CA突变检测试剂中的PIK3CA基因突变型选自: 突变名称 碱基突变形式 氨基酸突变形式 外显子 B1E542K GAAAAA Glu542Lys 9 B2E545K GAGAAG Glu545Lys 9 B3E545D GAGGAT Glu545Asp 9 B4H1047R CATCGT His1047Arg 20 B5H1047L CATCTT His1047Leu 20 所述相关引物和探针核苷酸序列如下:IC:内标特异性内标上游引物IL:ATGGGAAACAGACGAATGC内标下游引物IR:ACAGCAAATAAAAGAAACTAAAACA内标探针IP:TCCTGAGACTTCCACACTGATGCB1:E542K突变突变型上游引物M1L:CTACACGAGATCCTCTCTGCA突变型下游引物M1R:GAGATCAGCCAAATTCAGTTACT突变型探针M1P:ATGGAGTCACAGGTAAGTGCTAAAATGGB2:E545K突变突变型上游引物M2L:CGAGATCCTCTCTCTGAAATTACTA突变型下游引物M2R:GAGATCAGCCAAATTCAGTTAGT突变型探针M2P:ATGGAGTCACAGGTAAGTGCTAAAATGGB3:E545D突变突变型上游引物M3L:GATCCTCTCTCTGAAATCACTCGT突变型下游引物M3R:GAGATCAGCCAAATTCAGTTACT突变型探针M3P:ATGGAGTCACAGGTAAGTGCTAAAATGGB4:H1047R突变突变型上游引物M4L:ATGAAACAAATGAATGATGCATG突变型下游引物M4R:CAGAGTGAGCTTTCATTTTGT突变型探针M4P:TGGCTGGACAACAAAAATGGATTGGB5:H1047L突变突变型上游引物M5L:CATGAAACAAATGAATGATGCTAT突变型下游引物M5R:CAGAGTGAGCTTTCATTTTGT突变型探针M5P:TGGCTGGACAACAAAAATGGATTGGB6:野生型野生型上游引物WL:AGCTCAAAGCAATTTCTACACGT野生型下游引物WR:GAGATCAGCCAAATTCAGTTACT野生型探针WP:ATGGAGTCACAGGTAAGTGCTAAAATGG。
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百度查询: 苏州华益美生物科技有限公司 人PIK3CA基因的多突变的检测试剂盒及检测方法
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