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鸭病毒性肠炎病毒检测试剂盒及应用 

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申请/专利权人:北京亿森宝生物科技有限公司

摘要:本发明涉及生物检测技术领域,尤其涉及一种鸭病毒性肠炎病毒检测试剂盒及应用。本发明所述试剂盒包被的抗原蛋白为gB蛋白和gC蛋白。gB蛋白和gC蛋白是IBDV主要结构蛋白,本发明将gB蛋白和gC蛋白混合进行包被,基于化学发光免疫分析方法,能在鸭病毒性肠炎感染初期准确检测出抗体,且灵敏度高,敏感性和特异性强,稳定性好,对鸭病毒性肠炎的防控和畜牧业的发展有着重大意义。

主权项:1.检测试剂盒,其特征在于,包括包被液、包被板、酶标二抗、样品稀释液、阳性对照血清、阴性对照血清、发光底物和洗涤液,所述包被液以pH值为9.2-9.8的碳酸盐缓冲液为基础溶剂,添加的抗原由0.9-1.1μgml的gB蛋白和0.9-1.1μgml的gC蛋白组成;所述gB蛋白通过SEQIDNO.1所示核苷酸序列的基因表达得到;所述gC蛋白通过SEQIDNO.2所示核苷酸序列的基因表达得到;所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的羊抗鸭IgG抗体,稀释倍数为1:10000;所述样品稀释液为含有酪蛋白和Tween-20的磷酸盐缓冲液;以磷酸盐缓冲液的体积为100vol%计,酪蛋白的含量为0.4-0.6vol%,Tween-20的含量为0.4-0.6%vol%;所述发光底物包括发光底物A和发光底物B;所述发光底物A以pH值为7.5-8.5、浓度为0.04-0.06molL的Tris缓冲液为基础溶剂,添加0.08-0.12mmolL的鲁米诺和0.08-0.12gL的羟基香豆素;所述发光底物B以pH值为5.0-5.5、浓度为0.04-0.06molL的醋酸铵溶液为基础溶剂,添加0.06-0.08mmolL的维生素C和2.7-3.3mmolL的氨基酸氧化酶;所述洗涤液以10倍浓缩计,包括0.018-0.022molL的磷酸二氢钠、0.07-0.09molL的磷酸氢二钠、1.29-1.45molL的氯化钠和0.4-0.6vol%的Tween-20;所述洗涤液以10倍浓缩计,pH值为7.3-7.5。

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