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申请/专利权人：广西壮族自治区兽医研究所
摘要：本发明公开了一种多亚型禽流感病毒混合感染中单一病毒纯化的方法：1采用亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备单克隆抗体腹水；2制备混合样品；3用HI测定单克隆抗体腹水的效价，对单克隆抗体腹水做稀释；4将2倍倍比稀释后所得单克隆抗体腹水与待测样混合，震荡混匀使待测样与不同稀释度的单克隆抗体中和反应；5用终点稀释法中和反应后所得反应液进行稀释、纯化，即得。本发明方法使单抗和病毒相对定量中和，尽量减少单抗和病毒用量，中和反应更加灵敏和准确，节约成本和纯化时间，保持了病毒原有生物特性，通过本发明纯化后得到的病毒进行检测鉴定，鉴定结果的准确性确实较单因子血清方法高。
主权项：1.一种多亚型禽流感病毒混合感染中单一病毒纯化的方法，其特征在于，包含以下操作步骤：1采用不同亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备单克隆抗体腹水；2制备混合样品并初步鉴定，得到待测样；3用HI测定步骤1制得的单克隆抗体腹水的效价，对单克隆抗体腹水做稀释；4将步骤32倍倍比稀释后所得单克隆抗体腹水与步骤2所得待测样混合，震荡混匀后37℃放20分钟，使待测样与不同稀释度的单克隆抗体中和反应；5用终点稀释法对步骤4中和反应后所得反应液进行稀释，每组每管都选择10-1和10-2两个稀释度分别接种SPF鸡胚各两枚；传代收胚后用HI试验逐代检测AIVs纯化效果，当发现相应尿囊液中各病毒用单抗做HI实验时的滴度高于24时，继续按上述方法添加相应步骤32倍倍比稀释后所得单克隆抗体腹水进行中和，直至HI试验证明病毒已经纯化了，再稀释传代1次，即得。
全文数据：
权利要求：
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