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申请/专利权人:万有生化智能科技(深圳)有限公司
摘要:本发明的非侵入性尿酸比色试纸及其制造方法和检测方法,包括亲水衬垫和疏水衬垫,亲水衬垫固定设置在疏水衬垫靠近一端的位置;亲水衬垫上饱和浸渍包括显色剂、多功能改性剂、尿酸酶和辣根过氧化物酶的混合试剂。使用结合酶反应、氧化反应和催化反应的方法,利用特定显色剂和多功能改性剂检测尿酸水平。在含有尿酸的溶液中,三个主要连续反应导致亲水垫的颜色从无色变为蓝色。更高浓度的尿酸产生更高浓度的H2O2,形成更高浓度的二胺‑二亚胺电荷转移CT复合物,导致更强烈的蓝色。根据蓝色强度的差异,可以确定生物体液中尿酸水平,特别是在尿样本中。可以无创快速现场测试尿酸,实现尿酸水平检测结果的快速实时获取。
主权项:1.一种非侵入性尿酸比色试纸,其特征在于:包括有亲水衬垫和疏水衬垫,所述亲水衬垫为矩形结构,所述疏水衬垫为长条形结构,所述亲水衬垫固定设置于疏水衬垫的上表面靠近一端的位置;所述亲水衬垫的制备过程如下:准备了四种不同的浸渍溶液;将壳聚糖粉溶于稀释的乙酸中,得到浓度为0.5-3mgml的壳聚糖溶液Ⅰ;将TMB溶液溶解在醇溶液中,得到浓度为5-25mM的溶液Ⅱ;醇溶液是甲醇或乙醇溶液;将HRP溶于pH为6-7的缓冲液中,制备浓度为0.1-0.6mgml的HRP溶液;得到溶液Ⅲ;将尿酸酶溶解在pH为8-9的缓冲溶液中,生成每体积活性为20-140Uml的尿酸酶溶液;得到溶液Ⅳ;将所述亲水衬垫浸透溶液Ⅰ然后晾干;再浸透溶液Ⅱ再晾干;接着浸透溶液Ⅲ晾干;然后浸透溶液Ⅳ并晾干,最后存放于带干燥剂的密闭容器中;所述亲水衬垫上设置有混合试剂;所述混合试剂用于暴露在尿酸样本时发生连续的选择性酶反应和催化氧化反应;所述混合试剂至少包括有尿酸酶、辣根过氧化物酶、显色剂和多功能改性剂,多功能改性剂是壳聚糖;所述尿酸酶用于选择性捕获尿酸分子后转化为5-脲基乙内酰脲,二氧化碳和作为氧化剂的过氧化氢;所述显色剂用于与过氧化氢发生单电子氧化反应,首先产生一种自由基阳离子,然后形成蓝色二胺-二亚胺电荷转移复合物;所述辣根过氧化物酶用于催化并促进亲水衬垫中显色剂的单电子氧化反应;所述多功能改性剂用于通过交联和接枝将尿酸酶和辣根过氧化物酶固定于亲水衬垫内,增加显色剂稳定性和色素在亲水衬垫内的分布均匀性,以及亲水性垫的润湿性。
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