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申请/专利权人：西安交通大学口腔医院
摘要：一种靶向骨髓间充质干细胞的工程化外泌体、制备方法及应用，方法中，构建过表达circHIPK3的工程化外泌体，构建脂质偶联物DSPE‑PEG2000‑EPLQLKM产物，构建既富集circHIPK3又能靶向BMSC的工程化外泌体，其中，将富集circHIPK3的工程化外泌体和DSPE‑PEG2000‑EPLQLKM产物在PBS缓冲液中充分混匀并在室温下孵育，在超速离心管中用PBS缓冲液洗涤，通过超速离心以除去游离DSPE‑PEG2000‑EPLQLKM，最终得到既富集circHIPK3又能靶向BMSC的工程化外泌体。
主权项：1.一种靶向骨髓间充质干细胞的工程化外泌体制备方法，其特征在于，包括如下步骤：构建过表达circHIPK3的工程化外泌体，其中，circHIPK3慢病毒转染HEK293T细胞，通过嘌呤霉素筛选过表达circHIPK3的HEK293T细胞，收集其培养上清，通过超速离心法分离提取富集circHIPK3的工程化外泌体：构建脂质偶联物DSPE-PEG2000-EPLQLKM产物，称取100mg硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺溶于3ml二甲基甲酰胺中，加入E7多肽溶解完全，DSPE-PEG2000-Mal与E7多肽浓度比为1:1.5，将反应液转移至透析袋，于纯水中透析后，收集透析液冷冻干燥得DSPE-PEG2000-EPLQLKM产物，构建既富集circHIPK3又能靶向BMSC的工程化外泌体，其中，将富集circHIPK3的工程化外泌体和DSPE-PEG2000-EPLQLKM产物在PBS缓冲液中充分混匀并在室温下孵育，在超速离心管中用PBS缓冲液洗涤，通过超速离心以除去游离DSPE-PEG2000-EPLQLKM，最终得到既富集circHIPK3又能靶向BMSC的工程化外泌体。
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