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仿生纳米颗粒对变异链球菌膜表面黏附因子的捕获方法 

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申请/专利权人:重庆医科大学附属口腔医院

摘要:本发明涉及微生物资源获取技术领域,公开了仿生纳米颗粒对变异链球菌膜表面黏附因子的捕获方法,包括获取能与变异链球菌发生共聚的益生菌的外膜;制备200±20nm直径大小的LA@PLGA仿生纳米颗粒;获取变异链球菌膜表面蛋白组分溶液;通过LA@PLGA仿生纳米颗粒与变异链球菌膜表面蛋白组分溶液混合孵育,然后离心分离得到沉淀及上清液两组分,并通过差异蛋白组学定量分析得到黏附因子。采用本方案成功捕获了变异链球菌膜表面与益生菌发生共聚的特异黏附因子,通过本方法可以提取特异的黏附因子,对于因该黏附因子与牙齿病变疗效研究,起到关键作用。

主权项:1.仿生纳米颗粒对变异链球菌膜表面黏附因子的捕获方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一:筛选能与变异链球菌发生共聚的益生菌,通过机械法去除益生菌膜内物质,分离得到益生菌外膜;步骤二:将益生菌外膜与PLGA-NPs溶液进行混合,并采用超声处理10min混合均匀;使用脂质体挤出器将混合溶液通过200nm滤膜挤出,得到直径200±20nm的仿生纳米颗粒;步骤三:获取变异链球菌外膜,将外膜进行裂解得到变异链球菌膜表面蛋白组分溶液;步骤四:将步骤二中的仿生纳米颗粒溶液与步骤三中的变异链球菌膜表面蛋白组分溶液等量混合,并通过混合仪混合,进行超4小时的孵育;步骤五:将步骤四进行孵育的混合液取出,离心分离上清液及沉淀组分;步骤六:取沉淀组分在PBS缓冲液中洗涤2-3次,然后将其沉淀进行裂解,即可得到黏附因子。

全文数据:

权利要求:

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