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申请/专利权人：住友制药株式会社;国立研究开发法人理化学研究所

摘要：本发明提供神经细胞或神经组织的制备方法，所述方法包括下述步骤1‑3：1第一步，用于在不存在饲养细胞的条件下在包括下述各项的培养基中培养多能干细胞：1TGFβ家族信号转导途径抑制剂和或Sonichedgehog信号转导途径激活剂，和2未分化维持因子；2第二步，用于悬浮培养第一步中得到的细胞，从而形成细胞聚集体，和3第三步，用于在存在或不存在分化诱导因子的条件下悬浮培养第二步中得到的细胞聚集体，从而得到包括神经细胞或神经组织的聚集体。

主权项：1.用于制备视网膜组织的方法，所述方法包括下述步骤：1第一步，在不存在饲养细胞的条件下在含有a和b的培养基中培养多能干细胞，由此获得维持多能样状态的细胞：其中，a为TGFβ家族信号转导途径抑制物质和或Sonichedgehog信号转导途径激活物质，b为用于维持未分化状态的因子，2第二步，分散第一步中得到的细胞和悬浮培养所述分散的细胞，从而形成细胞聚集体，3第三步，在存在BMP信号转导途径激活物质的条件下悬浮培养第二步中得到的聚集体，直到出现表达Rx基因，Pax6基因和或Chx10基因的细胞，从而得到包括视网膜祖先细胞的聚集体，4第四步，在不补充任何BMP信号转导途径激活物质的培养基中悬浮培养第三步中得到的聚集体7天至200天，从而得到包括视网膜组织的聚集体，其中所述多能干细胞是人工多能干细胞，非人胚胎干细胞，或可商购的人胚胎干细胞，所述TGFβ家族信号转导途径抑制物质是选自由Lefty、SB431542、A-83-01、LDN193189和Dorsomorphin组成的组的一种或多种，所述Sonichedgehog信号转导途径激活物质是选自由Shh、SAG或Purmorphamine组成的组的一种或多种，所述BMP信号转导途径激活物质是选自由BMP2、BMP4、BMP7和GDF7组成的组的一种或多种蛋白，所述用于维持未分化状态的因子是选自由bFGF，FGF4，FGF8，Nodal，激活蛋白A，激活蛋白B，TGFβ1，和TGFβ2组成的组的一种或多种蛋白。

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