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摘要：本发明涉及用于纯化抗体的方法，所述方法包括有限数量的步骤，同时仍允许以适当的纯度水平获得高产率的经纯化抗体。简而言之，此方法仅包括过滤和沉淀步骤，而省略了对层析步骤的需要。

主权项：1.一种用于从溶液中纯化蛋白质的方法，所述蛋白质是包含免疫球蛋白单可变结构域ISVD的多肽，所述溶液获自在宿主或宿主细胞中表达所述蛋白质，所述方法包括：a第一过滤步骤，其包括：i使所述溶液通过第一膜，从而产生包含所述蛋白质的第一渗透物，其中所述第一膜具有在40kDa与100kDa之间、优选在40kDa与80kDa之间、甚至更优选50kDa标称截留分子量NMWCO的孔径；并且其中所述第一膜的标称截留分子量大于所述蛋白质的标称分子量；b第二过滤步骤，其包括：i使用第二膜浓缩在步骤a结束时获得的所述第一渗透物，从而产生包含所述蛋白质的第一渗余物，其中所述第二膜具有在2kDa与50kDa之间、如在4kDa与40kDa之间、在6kDa与30kDa之间、在8kDa与20kDa之间、更优选10kDa或15kDaNMWCO的孔径；并且其中所述第二膜的标称截留分子量小于待纯化的蛋白质的标称分子量；c沉淀、洗涤和重悬浮步骤，其包括：i沉淀在步骤b结束时获得的包含所述蛋白质的所述第一渗余物，直到形成包含所述蛋白质的沉淀物；ii使用第三膜洗涤包含所述蛋白质的所述沉淀物；iii重悬浮在步骤cii结束时获得的经洗涤的沉淀物，从而产生包含所述蛋白质的第二渗余物；iv使在步骤ciii结束时获得的包含所述蛋白质的所述第二渗余物通过所述第三膜而过滤，从而产生包含所述蛋白质的第二渗透物，其中所述第三膜具有在0.05-0.35μm之间、如0.1-0.3μm或者在0.15-0.25μm之间、如0.2μm的孔径；d超滤渗滤UFDF步骤，其包括：i使用第四膜渗滤在步骤c结束时获得的包含所述蛋白质的所述第二渗透物，从而产生包含所述蛋白质的第一渗滤物，其中所述第四膜具有在2kDa与50kDa之间、如在4kDa与40kDa之间、在6kDa与30kDa之间、在8kDa与20kDa之间、更优选10kDa或15kDaNMWCO的孔径；并且其中所述第四膜的标称截留分子量小于待纯化的蛋白质的标称分子量；ii使用所述第四膜浓缩在步骤di结束时获得的包含所述蛋白质的所述第一渗滤物，从而产生包含所述蛋白质的第三渗余物；iii使用所述第四膜渗滤步骤dii的包含所述蛋白质的所述第三渗余物，从而产生包含所述蛋白质的第二渗滤物；e任选的配制和最终过滤步骤，其包括：i在配制缓冲液中配制在步骤d结束时获得的包含所述蛋白质的所述第二渗滤物，从而产生包含所述蛋白质的经配制的产物；和ii任选地过滤所述经配制的产物；其中所述蛋白质具有在5kDa-200kDa之间的分子量MW，优选地所述蛋白质具有在10kDa与150kDa之间、优选在15kDa与100kDa之间、甚至更优选在15kDa与50kDa之间、如在15kDa-30kDa之间、如约20kDa的MW。

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