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摘要：本发明提供了一种特异性定量标定白细胞介素7Interleukin‑7活性的细胞系及其应用。具体地，本发明提供了一种构建体、载体、宿主细胞、试剂盒及其应用与制备方法，利用本发明的构建体、载体、宿主细胞、试剂盒可构建特异性定量标定白细胞介素7IL‑7活性的IL‑7报告细胞，从而实现对IL‑7活性的稳定、高准确性、高灵敏度的定量检测，为IL‑7相关药物开发提供精确的质控手段。
主权项：1.一种制备特异性定量标定白细胞介素7IL-7活性的细胞系的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：S1提供待改造的293T细胞；S2利用基因编辑技术将报告基因敲入所述细胞基因组的AAVS1位点，所述报告基因为诱导表达的报告基因，当STAT5b蛋白磷酸化时所述报告基因诱导表达；其中，所述报告基因为荧光素酶基因；所述步骤S2使用第五构建体，所述第五构建体含有用于诱导表达荧光素酶的表达盒，所述表达盒含有荧光素酶的编码序列和RE340启动子，所述RE340启动子的序列如SEQIDNO:6所示；S3向步骤S2中获得的细胞导入以下构建体：i第一构建体，所述第一构建体含有用于表达CD132蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:2所示的序列和CMV启动子；ii第二构建体，所述第二构建体含有用于表达CD127蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:3所示的序列；iii第三构建体，所述第三构建体含有用于表达STAT5b蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:4所示的序列和EF1a启动子；和iv第四构建体，所述第四构建体含有用于表达JAK3蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:5所示的序列和CMV启动子；其中，所述第一构建体和第二构建体位于相同的载体上，所述第一构建体中的CMV启动子同时驱动CD132蛋白和CD127蛋白的表达；在所述第一构建体和第二构建体之间，还包括用于表达连接肽的表达盒；从而获得所述特异性定量标定白细胞介素7IL-7活性的细胞系。
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百度查询： 星奕昂(上海)生物科技有限公司 一种特异性定量标定白细胞介素7活性的细胞系及其应用
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