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摘要：本发明提供了一种特异性定量标定白细胞介素15Interleukin‑15活性的细胞系及其应用。具体地，本发明提供了一种构建体、载体、宿主细胞、试剂盒及其应用与制备方法，利用本发明的构建体、载体、宿主细胞、试剂盒可构建特异性定量标定白细胞介素15IL‑15活性的IL‑15报告细胞，从而实现对IL‑15活性的稳定、高准确性、高灵敏度的定量检测，为IL‑15相关药物开发提供精确的质控手段。

主权项：1.一种制备特异性定量标定白细胞介素15IL-15活性的细胞系的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：S1提供待改造的293T细胞；S2利用基因编辑技术将报告基因敲入所述细胞基因组的AAVS1位点，所述报告基因为诱导表达的报告基因，当STAT5b蛋白磷酸化时所述报告基因诱导表达；其中，所述报告基因为荧光素酶基因；所述步骤S2使用第六构建体，所述第六构建体含有用于诱导表达荧光素酶的表达盒，所述表达盒含有荧光素酶的编码序列和RE340启动子，所述RE340启动子的序列如SEQIDNO:7所示；S3向步骤S2中获得的细胞导入以下构建体：i第一构建体，所述第一构建体含有用于表达CD132蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:2所示的序列和CMV启动子；ii第二构建体，所述第二构建体含有用于表达CD122蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:3所示的序列；iii第三构建体，所述第三构建体含有用于表达STAT5b蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:4所示的序列；iv第四构建体，所述第四构建体含有用于表达CD25蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:5所示的序列和EF1a启动子；和v第五构建体，所述第五构建体含有用于表达JAK3蛋白的表达盒，所述表达盒含有如SEQIDNO:6所示的序列和CMV启动子；其中，所述第一构建体和第二构建体位于相同的载体上，所述第三构建体和第四构建体位于相同的载体上；所述第一构建体中的CMV启动子同时驱动CD132蛋白和CD122蛋白的表达；所述第四构建体中的EF1a启动子同时驱动CD25蛋白和STAT5b蛋白的表达；在所述第一构建体和第二构建体之间以及在所述第三构建体和第四构建体之间，还包括用于表达连接肽的表达盒；从而获得所述特异性定量标定白细胞介素15IL-15活性的细胞系。

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