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摘要：本发明提供了一种二代测序反应通用测序试剂及其制备方法，属于核酸测序仪测序试剂制备技术领域。本发明的通用测序试剂包括以下原料组分：四种dNTPs衍生物、DNA聚合酶、Buffer和PCR增强剂；所述PCR增强剂的组成为：牛血清白蛋白BSA、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮PVP、1‑丁基‑3‑甲基咪唑溴盐[BMIm]Br的组合。本发明的测序试剂不会对DNA聚合酶的活性造成影响，减少化学键的残留降低碱基错配几率，并能增加DNA文库的稳定性和PCR的扩增效率，提高测序数据的质量；同时仅需激发光源和相机便能实现对DNA文库的测序，降低了对测序仪的要求，有利于二代测序技术和二代测序仪的向下普及。
主权项：1.一种二代测序反应通用测序试剂，其特征在于，包括以下原料组分：四种dNTPs衍生物、DNA聚合酶、Buffer和PCR增强剂；所述四种dNTPs衍生物包括化合物1、化合物2、化合物3和化合物4，其均为2’-脱氧核苷酸衍生物，具有如式Ⅰ所示的结构： 式Ⅰ化合物1、2、3、4的化学结构式其中，R1为碱基；L1为可切割连接基团的任意一种；R2和R3为荧光基团或不存在；R4为磷酸基团；R5为能够进行正交切割反应的保护基团；所述碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶或胞嘧啶；L1为以下可切割连接链的任意一种： R5为以下任意一种结构的保护基团： 其中，所述PCR增强剂的组成为：牛血清白蛋白、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮、1-丁基-3-甲基咪唑溴盐的组合，其中牛血清白蛋白的浓度为1-10mgmL，海藻糖的浓度为0.1-1molL，聚乙烯吡咯烷酮的浓度为5-100mgmL，1-丁基-3-甲基咪唑溴盐的浓度为1.0-2.0molL。
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