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摘要:本发明提供了兰花的快速育种方法,并将其应用在蝴蝶兰的育种中。本发明切取外植体前先将植株在弱光条件下预培养、采用大蒜提取液作为消毒剂、诱导前期在低温弱光条件下诱导、诱导培养基中添加维生素与熊果苷共同作用、增殖培养基中添加二硫苏糖醇与绿茶多酚共同作用,通过以上多重手段共同作用,有效减少外植体褐变。本发明采用大蒜提取液作为消毒剂不易对外植体造成机械损伤和化学伤害,有助于减少酚类物质的释放和氧化。大蒜提取液中含有的抗氧化成分能够清除自由基,抑制氧化反应的发生,从而减少褐变现象。采用放线菌发酵液提取液作为诱变剂,毒性风险大大降低,减少了对植物细胞造成不必要的损伤,有助于植株的生长。
主权项:1.兰花的快速育种方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.选择生长健壮、无病虫害、苗龄为8-12个月的蝴蝶兰植株,在室内进行预培养,培养10-20d;S2.在避光条件下切取植株茎尖5-15mm的生长点部分作为外植体,并进行消毒处理;S3.将消毒后的外植体置入放线菌发酵液提取液中,所述外植体与放线菌发酵液提取液质量体积比gmL为1.0-1.5:2.5-3.5,在25-30℃下进行诱变处理,处理时间为36-48h;S4.将诱变后的外植体接种到诱导培养基上,每个培养瓶接种3-5个外植体;将培养瓶置于光照培养箱中,控制温度为15-20℃,光照强度为400-600lus,光照时间为8-12hd,培育15-20d;将诱导阶段形成的愈伤组织割成小块,每块包含2-3个增殖点,接种到增殖培养基上,每个培养瓶接种5-10个增殖块;将培养瓶置于光照培养箱中,控制温度为24-26℃,光照强度为1000-1500lus,光照时间为12-16hd,培育30-40d,期间每隔10-15d进行继代培养;将增殖阶段得到的增殖块切割成小块,每块包含1个芽点,接种到分化培养基上,每个培养瓶接种5-10个分化芽;将培养瓶置于光照培养箱中,控制温度为22-24℃,光照强度为1500-2000lus,光照时间为10-14hd,培育40-50d;将分化阶段得到的组培苗接种到生根培养基上,每个培养瓶接种3-5株组培苗;将培养瓶置于光照培养箱中,控制温度在24-26℃,光照强度为800-1200lus,光照时间为8-12hd,培育20-30d;S5.打开培养瓶瓶盖进行室内炼苗处理,然后再进行室外炼苗处理;S6.炼苗结束后,将组培苗从培养瓶中取出,用纯净水清洗组培苗的根系和叶片,去除残留的培养基和杂质,并将组培苗置入0.1wt%的高锰酸钾溶液中浸泡5-10min进行消毒处理,然后取出组培苗将其晾干后移栽到基质中;S7.种植20-30d后,每7-10天使用3000-4000倍氮磷钾平衡肥进行叶面喷施及浇灌,在光照6000-10000lux,温度24-26℃,保持通风条件下培养90-100天;之后每10-14天使用2000-2500倍氮磷钾平衡肥进行叶面喷施及浇灌,在光照10000-15000lux,温度24-28℃,相对湿度65-85%条件下培养100-120天;之后每14-21天使用800-1200倍氮磷钾平衡肥进行叶面喷施及浇灌,在光照12000-18000lux,温度26-30℃,相对湿度70-80%条件下种植120-130天;S8.筛选出观赏性状一致、稳定的优良株系,完成育种。
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